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格尔德霉素基因工程高产菌株的构建和培养-微生物学报
生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2008, January 25; 24(1): 15-20
Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@ ©2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved.
研究报告
赫卫清, 周红霞, 王红远, 高群杰, 王以光
/ , , 100050
: 在格尔德霉素产生菌吸水链霉菌 17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)中存在两种 3-氨基-5-羟基苯甲酸
(3-amino-5-hydroxybenzoic acid, AHBA) 的生物合成基因簇, 根据同源性可分为苯醌类和萘醌类。已证明其中苯醌类的
AHBA 生物合成基因簇负责格尔德霉素(geldanamycin, Gdm)起始单位的合成, 而萘醌类的AHBA 基因簇可能参与未知
安莎化合物的生物合成。为提高吸水链霉菌 17997 菌种的Gdm 发酵产量, 并研究高产菌种在固体培养基上孢子的生长
周期。采用基因阻断技术, 将吸水链霉菌 17997 中的萘醌类AHBA 生物合成基因簇(shnSOP)进行破坏, 以获得ΔSOP 菌
株, 从而减少对合成所需共同底物AHBA 的争夺。HPLC 分析结果表明ΔSOP 菌株Gdm 的发酵产量比原株提高185%。
同时, 通过孢子计数发现该菌株在固体培养基上的孢子生长经历2 个周期, 第2 代孢子菌种的Gdm 产量较高。
: 吸水链霉菌 17997, 格尔德霉素, 基因阻断, 孢子形成周期
Construction and Cultivation of Genetically-engineered Strain
to Improve Geldanamycin Production
Weiqing He, Hongxia Zhou, Hongyuan Wang, Qunjie Gao, and Yiguang Wang
Institute of Medicinal Biotechnology , CAMS PUMC, Key Laboratory of Biotechnology of Antibiotics, Ministry of Health, Beijing 100050, China
Abstract: To improve the production of geldanamycin in Streptomyces hygroscopicus 17997, gene disruption was done to delete the
naphthalenic AHBA genes (shnSOP), encoding the products that share the common biosynthetic substrates with geldanamycin. The
resulting mutant strain (ΔSOP) was cultivated on a solid medium and the amount of spores collected from the plates was calculated
from 5 to 14 days and the yield of geldanamycin was measured by HPLC. The geldanamycin production of the ΔSOP strain increased
by 185% comparing w
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