ForteBioOctet检测分子间相互作用.PDF

活性蛋 白整体 方案 Active Protein Solutions ForteBio Octet®检测分子间相互作用 Octet®RED96分子间相互作用检测系统是由 ForteBio 公司生产的全自动测试平台 ，可用于测量蛋白质与生物分 子之间的相互作用。该系统基于生物膜层光学干涉 （BLI ）技术 ，只需微量样本 ，无需标记 ，可提供生物分子相互 作用的实时分析结果。Octet®RED96系统在蛋白质分析方面的卓越表现能够加快和简化您的科研与生产流程。 ForteBio Octet®检测原理 生物膜层光学干涉 （BLI ）技术 当两列或几列光波在空间相遇时 ，会进行叠加 ，这种现象称为光的干涉。ForteBio Octet®仪器就是利用了光的干 涉现象。ForteBio Octet®仪器内部有生物传感器 ，生物传感器底端由生物膜层覆盖 ，生物膜层可结合并固定生物 分子。当具有一定带宽的可见光垂直入射生物膜层时 ，光在生物膜层的两个界面反射后形成一定波长的干涉波 （图 （a ））。当固定分子与溶液中分子发生相互作用时 ，生物膜层厚度增加 ，干涉光谱曲线向波长增加的方向移动 （图 （b ）），光波相位移动由工作站实时探测 ，对光波的相位移动进行分析便可定量得出传感器表面分子数量变化及 相关浓度与动力学数据。 图 （b ）：生物膜层厚度增 图 （a ）：在生物膜界面反射后 ForteBio Octet®检测仪器内部结构 ForteBio Octet®检测仪器内部结构 加 ，干涉光谱曲线向波长增加 形成一定波长的干涉波 操作流程 的方向移动 在分子间相互作用服务页有详细的 ForteBio Octet®操作流程视频演示。利用 Octet 可以实现分子间相互作用的定 性定量分析或对蛋白混合物种的样品浓度进行定量测定。 Tel (025) 5889-4959 www.DetaiB Sales@DetaiB 活性蛋 白整体 方案 ® Active Protein Solutions  对蛋白质相互作用进行定性定量分析 ，ForteBio Octet 仪器的操作流程 （Octet 传感器的传感顺序 ）为 “Buffer-Ligand Biotin-Buffer-Protein of Interest-Buffer”,每一步操作都可以得到相应的曲线 （如下图 所示 ）。  对蛋白质混合物中样品浓度进行定量测定 ，Otet 传感器的传感顺序为 “Standards-Test Samples” ，仪器 先对标准品进行测定并绘制标准曲线 （下图a ），再接着对待测样品进行测定 ，并将得到的数据插入标准曲 线 （下图 b ），根据标准曲线可准确得到样品浓度。 ForteBio Octet®检测范围 可检测的样品包括 ：蛋白与蛋白 ，蛋白与小分子 ，抗原与抗体 ，蛋白和抗体 Fab片段 ，DNA 与 DNA 可测定的数据包括 ：判断分子间有无亲和力 ；测得判断分子间亲和力及解离速率数据 ，包括结合常数 ，解离常数和 亲和常数。 检测范围 ： Tel (02