儿童后颅凹常见胶质瘤pten基因突变蛋白表达缺失和生物学行为相关性及外源性pten基因转染c6胶质母细胞瘤株的实验分析外科学神经外科专业论文.docxVIP

堕篓堕型杰兰堕主差竺垒苎———————————————一中文摘要 堕篓堕型杰兰堕主差竺垒苎———————————————一 中文摘要 (PHN基因是定位于人染色休1 0q23．3区段的唯一具有磷嘲鼯每活性的 肿瘤却制基因，它的第5功能外显子编码的氨基酸序列具有双特异性磷酸酯 酶活性，其中脂性磷酸酶活性通过负性调节磷酸酰肌醇三磷酸P13P(第二信 使)信号的传导，抑制肿瘤细胞的增殖能力；而蛋白磷酸酶活性通过负性调 节FAK／P130【“和整合素相关激酶(ILK)信号的传导，在整合素介导的细胞 黏附、迁移和转移过程起抑带悱用。P1斟蛋白主要是通过引起细剧习期Gl 期阻滞、促进凋亡和抑制细胞非锚定性生长能力来苤荆黼恻泣的。近 来研究发现，PT刚基因在原发性恶性胶质瘤中有燃的变异(胶母的变异率 为1阱44％)，而且Frr斟蛋白失表达率更高(75％)，因此，多数学者已经对 “PTEN基因变异与胶质瘤的形成和恶性转化密切相关”的观点达成共识。儿 用免疫组织化学的方法{佥测了59例儿童后颅I“I胶须瘤(髓母细胞瘤34例； 星形细胞瘤15例；室管膜瘤10例)和10例成人大脑半球恶性胶质瘤中fyI同 蛋白的表达，同时检测了各种肿瘤的细胞增殖核抗原PCNA和PT斟蛋白磷酸 酶作用J氐物P-Tyr的表达。／结果显示：在髓母细胞瘤中，经典型髓母的细胞 增殖活性显著高于促硬纤维增生型髓母，而且Frr斟表达缺失是经典型髓母增 殖活性增高的主要原因，Frr刚的表达也是促硬纤维增生型髓母向成熟星形细 胞和神经元分化的始动冈素；髓母细胞痛、窜管膜痛和小腑星形细胞瘤中的 PTEN蛋白阳性表达率分别为23．53％、30％、8096，其肿瘤细胞增殖指数(麟A LI)分别为65．55％、68．57％、21．0896，二者的表达呈反向平行关系，P1刚 在这三种常见儿童后颅凹胶质痛中的表达差异说明，PTEN表达缺失与它们不 同的生物学行为密切市H关；在所有类型的肿瘤中，PTEN与PCNA的表达呈负 相关，说明PT斟缺失是肿瘤恶性转化和肿瘤增殖活性增加的主要原因；fyI刚 与P1yI、的表达呈负相关说明，PT斟仍具有蛋白酪氨酸磷酸酯酶活性，而且 这种蛋白磷酸酶活性也在肿瘤抑制效戍中发挥作用。接着，我们应用 —— —— 蔓塑匿型盔兰塑主兰堡堕墨．—— P踩书SCP的方法对34例髓母细胞瘤中PT斟基因第5、8两个重要功能外显 子进行了突变分析，发现髓母细胞瘤PTEN基因总的变异率为32．4％，显著高 于分化良好的小脑星形细胞瘤；但突变率低于蛋白失表达率也说明PT刚基因 转录后调节紊乱也在肿瘤形成中起作用。最后，我们对获赠的包含有人 眦DNA全长序列的PRpPT斟质粒i趟询。增和酶切鉴定后，用脂质体介导 PRK平唧q质粒转染大鼠C6胶质母细目包瘤株，兔期化染色发现稳定转染PT刚 基因的c6细胞能够表达PT斟功能蛋白。通过以b开究得出以可结论：PTEN 基因变异引起的功能蛋白的失表达是儿童后颅凹胶质瘤发生和发展过程中的 —个蕈要组成部分，而且基因的“转录后调节”紊乱也可能起一定作用；Frr刚 的表达可以促进原始髓母细胞瘤向成熟星形细胞或神经原分化，在肿瘤的良 恶性转化中起调节作用；PRK—Pn撕质粒载体在脂质体的介导下可以将w雕 基因整合剑C6胶质母细胞瘤的基因序列中去，并目通过宿主基因序列的表达 稳定地产生肌EN功能蛋白，这为以PTEN基因为靶点的基因治疗措施在胶质 r———一——————一 瘤治疗中的应用提供了实验理论依据。 关键词：儿童，后颅凹胶质瘤，髓母细胞瘤：PTEN／删ACl／TEPl基因突变， PcR-sscP j基囚治茨 ————蔓墅墨型盔兰堡主兰垡堡=!!；一——Abstract ————蔓墅墨型盔兰堡主兰垡堡=!!；一—— Abstract 哪N gefleiS a吼iqlle supp∞essofgenekated on hUmall chro】瑚lsome 10q23．3 locus mat posses phos]phat￡ISe ac嘶吼111e舢nc的nm eⅪ0Il 5 of PTEN 静le脚codes me c翻ai如c si印撒聪m砸f of p倒em够r08如e ph蛔妣她9es锄d f岫cd册s as a删唧)ec砸c畸pbos曲atascs．b却id phospila：cascs acd“ty 血}libits{tle pm恸ion of撇cells thmu出down-】嘲叫鲥【ng l量le si辨al tranSmcd呲of ph嗍ph撕dylinosi钳劬咖os】ml钯P13P(me s删nlesseng哪， I臼pmcein曲【os—}latases枷V矗y砌协its 1he锄