肺癌干细胞的氧化磷酸化异常与线粒体自噬关系的研究内科学专业论文.docxVIP

浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或 撰写过的研究成果，也不包含为获得逝婆盘堂或其他教育机构的学位或证书而 使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了 明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：瓴 签字日期： 印，莎年 j调专。日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构 送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝望盘堂可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：‘扬西 导师签名： 签字目期： 锄f‘年厂月害口曰 签字日期： 扣l 6，年r月丐7日 万方数据 斯江大学硕士学位论文 斯江大学硕士学位论文 致谢 致 谢 时光如梭，两年的硕士研究生生涯即将结束，这两年的生活是一个令人难忘的 历程。在此期间我得到的点滴都离不开身边老师、朋友们的支持和帮助，在即将毕 业之际，谨向所有关心和帮助我的各位表示最诚挚的谢意。 首先要衷心感谢我的导师王凯教授在这两年中对我学业上的悉心指导和生活 上的热情帮助。特别是在科研领域，是王老师带我入门，并为我提供了一个很好的 科研平台，帮助我迈出了扎实的科研第一步，正是他对学生创新性想法的鼓励与支 持使我对科研工作一直保持着热情。王老师高尚的医德医风、严谨治学虚心求教的 态度对我起到了很好的引导作用，让我在今后的求学和科研路上受益匪浅。我所取 得的每一点进步，都离不开王老师的帮助和支持。在此，谨向老师表示崇高的敬意 和衷心的感谢! 感谢浙医二院呼吸内科沈华浩教授，李雯主任，丁礼仁主任，王苹莉主任以及其 他科室所有老师对我学习的指导和帮助，感谢你们无私地传授我临床知识与技能， 在此致以我最衷心的感谢。 感谢朱永良老师在我的课题选题、实验设计及实验过程中对我的悉心指导和 帮助，他的求实创新精神使我在科研之路上受益颇多。感谢张敏师姐、柴守杰师兄、 钱盈盈师姐、王永芳师姐、周优师姐和徐霞师姐在实验操作和技术方面对我的指 导，并耐心地帮我共同解决实验中遇到的困难，是我在科研和生活上进步的榜样。 还有杨一鸣、张琛琛、黄章旦、黄飞腾、蓝波、徐海燕和其他所有的同学，正是在 他们鼓励、支持和帮助下，我才能顺利地完成我的课题。 感谢我的家人，他们一直在我身后支持鼓励我，为我创造了轻松、愉快的学习 条件，是我顺利完成学业的坚强后盾。 最后，再次感谢曾经帮助过我的所有朋友和亲人，我将用更大的进步来回报大 家的帮助和厚望! 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 肺癌干细胞的氧化磷酸化异常与线粒体自噬关系的研究 浙江大学医学院 内科学(呼吸病学) 硕士研究生 杨莹 导 师 王凯教授 中文摘要 肺癌是世界上发病率最高的癌症，其死亡率更是位列各类恶性肿瘤之首，而肺 癌干细胞(Lungcancer stemcells，LCSCs)的存在是肺癌发生转移、耐药和复发的 重要原因。线粒体是细胞进行氧化磷酸化的重要细胞器，而线粒体自噬则是细胞通 过自噬，特异性清除线粒体的主要途径。此外，目前已有相关文献报道肿瘤干细胞 (Cancer stem cell，CSC)有着特殊的代谢特点，其代谢的改变可能与线粒体变化 相关，同时在肿瘤干细胞中有存在活跃的自噬现象，但是关于自噬与代谢改变之间 的具体联系机制及作用仍不明确。 目的：本次研究旨在探究肺癌干细胞中的氧化磷酸化水平和线粒体变化情况， 重点关注肺癌干细胞中线粒体自噬在其中的作用，探讨肺癌干细胞代谢改变与线 粒体自噬之间的联系和可能的分子机制，从而为特异性针对肺癌干细胞的治疗提 供潜在靶点。 方法：1．通过无血清低粘附方法获得非小细胞肺癌及原代肺癌细胞系的单细胞 克隆球，从而富集各细胞系的LCSCs，再检测LCSCs中氧化磷酸化水平及线粒体 呼吸链复合酶II活性的变化；2．通过蛋白印迹及荧光染色等方法进一步检测LCSCs 中线粒体蛋白的表达情况；3．通过蛋白印迹及荧光染色等方法检测LCSCs中的自 噬及线粒体自噬现象。 结果：1．肺癌克隆球细胞线粒体氧化磷酸化水平下降，呼吸链酶复合物Ⅱ活性 下降；2．肺癌克隆球细胞的线粒体相关蛋白表达下调，且线粒体数目减少主要集中 在肺癌克隆球的静止期细胞；3．肺癌克隆球细胞的自噬活动增加，线粒体自噬相关 TT 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 蛋