探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乳腺癌及erα表达的影响普外科专业论文.docxVIP

摘要摘要 摘要 摘要 研究背景：调查数据显示，全球每年120万妇女罹患乳腺癌， 且有50万死于该病。在西欧、北美等发达国家，乳腺癌的发病率占 女性恶性肿瘤首位。随着我国生活水平的提高和环境、生活方式的 改变，我国乳腺癌的患病率呈现明显的增长趋势。2000年全国肿瘤 防治办公室发表了1988到1992年的调查报告，我国城市发病率明 显高于农村，上海乳腺癌发病率逐年升高，已占当地女性恶性肿瘤 首位。随着人们对各期乳腺癌许多大规模前瞻性临床研究以及乳腺 癌生物学性的不断认识，其治疗模式也发生了根本性改变。由以往单 纯局部治疗转入局部与全身相结合的综合治疗时代。 研究资料提示，雌激素是乳腺癌重要的有丝分裂刺激剂，它的这 种促分裂作用通过乳腺组织中的雌激素受体(ER)介导，ER Q阳性 成为乳腺癌患者抗雌激素治疗即内分泌治疗的依据。雌激素受体阳 性的病人对内分泌治疗效果显著好于雌激素受体阴性的病人，但是 有1／3以上的乳腺癌病人在诊断出乳腺癌的时候，其雌激素受体 一Q(ER-Q)为阴性，还有一部分雌激素受体阳性的病人在治疗过程 中，ER-Q转阴性。此类病人不适合行内分泌治疗，预后也较差。最 近的研究表明，DNMTl和HDAC分别为甲基化和乙酰化介导的导致ER Q基因沉默的关键调节剂。由于DNMTl和HDAC的作用，使DNA甲基 化以及组蛋白去乙酰化，导致DNA沉默，造成了部分乳腺癌患者的 ER Q表达缺失。组蛋白的乙酰化修饰在基因的转录调控中起着非常 重要的作用[5]。基因有序的转录调控是机体细胞维持正常功能的前 硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 提，如果基因转录调控功能紊乱，细胞可以发生癌变。HDAC抑制剂主 要的作用机制是通过抑制HDAC，阻断由于HDAC募集功能紊乱而导 致的基因表达受抑，从而治疗癌症。 目的： 1-在mRNA水平研究乳腺癌和乳腺纤维瘤中ER Q的表达，及与其 他临床因素的关系． 2．观察去乙酰化酶抑制剂(MS-275)对乳腺癌细胞株 MDA-MB-231和MCF一7中ER Q mRNA表达水平的影响。 3．观察去乙酰化酶抑制剂(MS-275)对乳腺癌细胞株增殖，调 亡的影响。 方法： 1．抽取组织总RNA，采用半定量逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR) 检测27例乳腺癌和15例乳腺纤维瘤组织中ER Q mRNA的表达，分析 其关系． 2．以MDA-MB-231和MCF一7乳腺癌细胞株为研究对象，以 1．0um01／LMS一275作用于细胞48小时，采用半定量逆转录一聚合酶链 反应(RT-PCR)检测用药前后乳腺癌细胞中ER Q表达水平的变化 3．以MDA-MB-231和MCF一7乳腺癌细胞株为研究对象，设定非 药物处理组和MS一275不同的浓度梯度作用于细胞，进行MTT试验， 并得出对癌细胞的生长抑制曲线。并采用流式细胞仪研究以 1．Oumol／LMS一275作用于细胞48小时后，两种乳腺癌细胞株的生物 Il 摘要学行为的变化。 摘要 学行为的变化。 结果：：口木． 1．乳腺癌癌组织ERQmRNA(与内参比值)为0．60±0．44，较乳 腺纤维瘤组织的0．26±0．16明显降低(P0．05)；但是ER Q mRNA 在乳腺癌及乳腺纤维腺瘤两种组织中的总表达率差异无显著性 (p0．05)。另外，ER Q的表达率与月经及年龄情况无关，在不同 的临床分期和有无淋巴结转移的病例中其表达率存在显著性差异 (p0．05)． 2．在1．Oumol／L浓度MS-275作用48小时后，MDA一船一231 恢复表达ER Q，非雌激素受体依赖的MDA—MB一231，未用药物干预 之前不表达ER—Q，药物处理后ER--Q出现表达，其表达的平均水 平为0．32+_0．11，pO．05。MCF一7未经药物干预时表达ER Q平均表 达水平0．52±0．44，药物处理后平均表达水平0．76±O．53，较未经 药物处理的细胞明显升高(pO．05)’． 3．MS-275显著抑制乳腺肿瘤细胞的生长。MTT检测结果显示， MS-275对细胞的抑制率随浓度和作用时间的增加而呈明显上升趋 势，与阴性对照组相比有显著性差异(pO．05)。流式细胞检测显示 MS一275作为抗肿瘤药物，影响细胞的增殖一可以使乳腺癌细胞的增 殖停滞在G1／S期和G2／M期，和阴性对照组及DMSO(MS-275的溶媒) 组，细胞调亡明显。差异有显著性(PO．05)． 结论： 1．组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以诱导雌激素受体阴性的乳腺癌