肝癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜光学切片观察.PDFVIP

维普资讯 第14卷 第3期 汕头大学医学院学报 vd．14 № ．3 2∞I Journal0f曲m劬 UDivn．~trM耐i口l 2∞l 肝癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜光学切片观察 霍霞 徐锡金 陈耀文 林珏龙 许险峰 (汕头大学医学院中心实验室 广东 汕头 515031) 提要 目的：建立培养细胞共聚焦激光扫描显微镜光学切片的方法，探讨肝癌细胞纤维肌动蛋白(F-~etin)的空间结扮 方 法 ：采用共聚焦激光扫描显授镜光学切片技术结合异硫酸氧荧光索．鬼笔环肽(FrrE—pl~loictin)标记纤维肌动蛋 白和碘化丙啶 (H)标记细胞校的荧光探针双重标记技术对肝癌细胞纤维肌动蛋白进行形态学观察和图像分析。结果：肝癌细胞内纤维肌 动蛋白微丝形成束状纤维，粗壮而密集，平行排列或纵横交错成网状贯穿整个细胞和细胞突起。结论：①共聚焦澈光扫描 显微镜的光学切片技术结合FITC—p}l~lloldin和n荧光探针双重标记技术是观察和分析细胞骨架系统三维立体结构的良好方 法；②肝癌细胞内纤维肌动蛋白微丝粗壮、形成柬状或网状结构。 美键词 肝癌细胞株；纤维肌动蛋白；共聚焦激光扫描显微镜：光学切片 中圈分类号 11735．7 11318．51 [文献标识码]A 文章编号2001)030174413 StudyofF—actin inLiverCarcinomaCellswithOpticalSectionsof ConfocalLaserScaningM icroscope HuoXia，Xu lag，ChertYa ．[inJ ，XuXianferllg (Depar~entofCentralLaborator3r，ShantouUniver~qMedicalCollege 515031) Absllaet Objective~ToestablishawayfortheootiealsectionsofConfocalLa~,ff-StartingNicro~cope(CLSN)ineul— IllrecellsandstudythespaticalstrtlctureofF-actininlivercarcinomacells．Methods：F-actinsmarkedbyFITC．口}Ia1． 1oidinandnue]ettsmarkedbyPIin fivercarcinomacellsⅧ observedbyCISM togeneratetheopae~lsections．then analyzedbyima~analysispr~edureofCISM．Results：InlivercareinemacellsNmchesofF-aetimraI删 parally0r reticularlythrou thewholecellOFcellularpr~firlenees，stLl anddense．Conclusi~：①1hewayof0b ngard a,lalr~ngcytoskdetom byCISN combinedwithF1Te—phalloidinandPIfluorescenceprobedouble1Bbe】jngtl~ ．Jqueto imagethinopticals~etionhasbeendevelooedandw 目0od．②InlivercarcinomacellsF-actinswerem rdyanddeme， r．n~r,gparallyOFretieularlythrou thewholecellOrcellularprominences． KeyW ords LiverCarcinomaCellLine：F—acfin；CISM：OpticalSections 细胞骨架是细胞 内蛋白质组成的网络系统，与