盐度和胁迫时间对九孔鲍α.pdf

中国水产科学 2017 年 1 月, 24(1): 5764 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.16146 盐度和胁迫时间对九孔鲍-淀粉酶基因表达量的联合效应分析 钱佳慧, 栗志民, 刘建勇, 艾加林 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088 摘要: 采用中心复合设计和响应曲面法研究了盐度和胁迫时间对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)-淀粉酶 基因表达量影响的联合效应, 旨在为九孔鲍盐度驯化及海区推广提供指导。实验设定盐度范围为22~40, 时间范围 为0~72 h, 建立了盐度、胁迫时间与-淀粉酶基因表达量之间关系的定量模型, 并通过分析明确了盐度和胁迫时间 的最优组合。结果表明, 盐度对九孔鲍-淀粉酶基因表达量影响的一次效应不显著(P0.05), 而二次效应极显著 (P0.01), 说明盐度与九孔鲍-淀粉酶基因表达量之间为非线性关系。随盐度升高, 淀粉酶基因表达量呈先上升后 下降的变化趋势, 当盐度为31 时淀粉酶基因表达量最大, 此时九孔鲍消化能力最强。胁迫时间对淀粉酶基因表达 量影响的一次效应显著(P0.05), 二次效应不显著(P0.05), 表明胁迫时间与九孔鲍-淀粉酶基因表达量之间呈线 性关系, 即随着胁迫时间的延长, 淀粉酶基因从开始低水平表达逐渐升高并恢复至正常表达水平。盐度和胁迫时间 之间不存在交互作用。对实验结果建立模型可知, -淀粉酶基因表达回归模型达极显著水平(P0.05), 且失拟项不 显著(P0.05), 表明实验拟合出的方程有效。回归方程的决定系数为 80.05%, 校正系数65.80%, 预测系数50.18%, 表明方程拟合度较好, 模型选择较为恰当, 可以为不同盐度和胁迫时间诱导下的淀粉酶基因表达量变化提供参考依据。 关键词: 九孔鲍; α-蛋白酶; 盐度; 胁迫时间; 基因表达量; 联合效应 中图分类号: S917 文献标志码: A 文章编号: 10058737(2017)01005708 -淀粉酶是众多蛋白酶中最重要的胞外蛋白 食物的消化吸收能力, 从而影响机体生长状况[10]; 酶, 它广泛存在于植物[1] [2] [3] 另一方面则是-淀粉酶的合成量对水生动物营养 、动物 、微生物 等多 种生物群体中。在水生动物中, -淀粉酶主要在营 吸收产生影响, 亦可以说-淀粉酶的基因表达变 养消化吸收、碳水化合物代谢等方面起到至关重 化在某种程度上可以反映机体生长情况[8] 。近年 要的作用[4] 。已有研究表明, 文蛤(Meretrix meri- 来有关水生动物-淀粉酶的研究日益增多, 但大 trix)不同个体间淀粉酶活力不同, 大个体文蛤中 多数研究都局限于生化水平, 极少从-淀粉酶基 淀粉酶活力较强[5]; 刺参(Morinane palensis)个体 因表达方面进行研究, 本研究从分子层面阐述了 在生长发育过程中, 淀粉酶活力逐渐升高, 且远 环境因子对-淀粉酶基因表达量的影响, 从基因 高于幼体期[6] 。此外, -淀粉酶基因的多态性与凡 水平上解释环境因子影响水生动物生长的原因。 纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)[7] 、合浦珠母贝 九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)原产 (Pinctada fucata)[8] 、草鱼(Ctenopharyn godon- 于台湾, 20 世纪90 年代初被引进广东, 现已成为 idellus)[9]生长性状具有显著相关性。以上研究均 广东沿海地区养殖鲍的主要种类[11]