川芎嗪对NB4细胞端粒酶活性的影响及其抗肿瘤的-第三军医大学学报.DOCVIP

川芎嗪对NB4细胞端粒酶活性、hTERT及c-myc表达的影响作者简介：王翠翠，女，山东烟台人，硕士研究生，主要从事血液肿瘤疾病的研究，电话：（023E-mail： HYPERLINK mailto:ytwangcui@163.com ytwangcui@163.com通讯作者：徐酉华，电话：（023E-mail： HYPERLINK mailto:xuyouhua54@163.com 作者简介：王翠翠，女，山东烟台人，硕士研究生，主要从事血液肿瘤疾病的研究，电话：（023E-mail： HYPERLINK mailto:ytwangcui@163.com ytwangcui@163.com 通讯作者：徐酉华，电话：（023E-mail： HYPERLINK mailto:xuyouhua54@163.com xuyouhua54@163.com 王翠翠 徐酉华 伍俞霓 沈亚莉 （重庆医科大学附属儿童医院血液肿瘤科，儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室，重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地，重庆 400014） 摘要：目的 通过检测川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)对NB4细胞增殖及端粒酶活性的影响,以及对人端粒酶逆转录酶（hTERT）、c-myc mRNA表达水平的影响，探讨川芎嗪抗肿瘤的作用机制。方法 不同浓度（100、300、500ug/ml）不同作用时间（24、48、72小时）的TMP作用于NB4细胞，采用MTT法检测细胞增殖；流式细胞术Annexin V-FITC／PI双染法检测细胞凋亡率；PCR-TRAP银染法定性检测端粒酶活性；PCR-TRAP-ELISA法定量检测端粒酶活性；RT-PCR法检测hTERT、c-myc mRNA表达。结果 MTT结果显示川芎嗪抑制NB4细胞增殖的作用呈浓度时间依赖性，川芎嗪500ug/ml作用72小时，NB4细胞增殖明显受到抑制，与对照组相比差异有统计学意义（P﹤0.01）；流式细胞术结果显示川芎嗪各浓度各时间组NB4细胞凋亡率与对照组相比无明显差异（P﹥0.05）；PCR-TRAP银染法定性检测端粒酶活性结果显示川芎嗪各浓度各时间组条带变浅，川芎嗪500ug/ml作用72小时，与对照组相比条带最浅；PCR-TRAP-ELISA法定量检测端粒酶活性结果显示随着川芎嗪浓度增加作用时间延长，端粒酶活性（A450nm）逐渐下降，川芎嗪500ug/ml作用72小时，端粒酶活性（A450nm）与对照组相比明显降低，差异有统计学意义（P﹤0.05）；RT-PCR结果显示川芎嗪500ug/ml作用72小时， hTERT、c-myc mRNA表达与对照组相比明显降低，差异有统计学意义（P﹤0.01）。结论 本实验提示川芎嗪可能通过下调hTERT、c-myc的表达来抑制NB4细胞的增殖，进而通过降低细胞的端粒酶活性而发挥其抗肿瘤的作用。 关键词：川芎嗪；白血病；端粒酶 中图法分类号： R285.5； R733.7 文献标识码：A Effect of telomerase activity、 hTERT and c-myc expression in human promyelocytic NB4 leukemia cells induced by tetramethylpyrazine Wang Cuicui,Xu Youhua,Wu Yuni,Shen Yali ( Department of Hematology, Children’s Hospital of Chongqing Medical University,Key Laboratory of Developmental Diseases in Childhood,Key Laboratory of Pediatrics in Chongqing,Chongqing International Science and Technology Cooperation Center for Child Development and Disorders,Chongqing ,400014,China) Abstract：Objective To detect telomerase activity and human telomerase reverse transcriptase (hTERT), c-myc mRNA expression in NB4 cells induced by tetramethylpyrazine(TMP),and explo