玉皇菇植物凝集素分离纯化与特性之探讨.DOC

玉皇菇植物凝集素分離純化與特性之探討 Studies on isolation, purification and characterization of Pleurotus citrinopileatus lectin 研究生： HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E9%99%B3%E5%8B%87%E6%99%BAfield=AU HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E6%A5%8A%E6%B5%9A%E5%B2%B3field=AU 楊浚岳 HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Hui-Ju%2C+Wangfield=AU HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Yang%2C+Jiung-Yuehfield=AU Yang, Jiung-Yueh 指導教授： HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E8%AC%9D%E5%AF%B6%E5%85%A8field=AD HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E6%B1%9F%E5%95%9F%E9%8A%98field=AD 江啟銘 ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E5%90%B3%E6%98%8E%E6%98%8Cfield=AD 吳明昌 HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Pao-Chuan+Hsieh%2C+Ph.D.field=AD HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Jiang%2C+Chii-Mingfield=AD Jiang, Chii-Ming ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Wu%2C+Ming-Changfield=AD Wu, Ming-Chang 【摘要】 凝集素(Lectins, Agglutinins, Affinitins, Phytohemagglutinins, Phasins Protectins)是一種結合碳水化合物之蛋白質，與醣蛋白、醣脂質或多醣有很高的親和力，具有使紅血球、正常或變形細胞發生凝集的特性。凝集素廣泛分布於自然界中，在植物、脊椎動物與無脊椎動物間均可發現它們的存在。本論文進行對玉皇菇植物凝集素分離純化並探討其一般特性，將玉皇菇子實體使丙酮破碎後，以10%氯化鈉溶液在50℃水浴下萃取一小時，經硫酸銨沉澱劃分收集40~80%飽和度者進行DEAE-Sepharose 離子交換層析，再以Sephacryl S-200膠濾層析純化，即可得到均質的玉皇菇凝集素。所得均質後萃取液用來檢測經或未經酵素(protease, trysin, papain)處理的人類正常A、B、O型紅血球及兔子紅血球凝集反應，結果均能產生凝集現象，顯示其對人類血型紅血球並沒有特異性，蛋白酵素或胰蛋白酵素處理人類及兔子紅血球，能增加凝集活性力價。當玉皇菇植物凝集素萃取時加入二價陽離子(Fe2+，Ca2+，Mg2+，Mn2+，Zn2+)後，其凝集活性有明顯提升的現象。以常見之17種醣與醣蛋白作醣類抑制試驗，玉皇菇植物凝集素並沒有特異醣存在。萃取液在4°C與-20℃下貯存70天，其凝集活性下降至原有活性的20%以下。此凝集素呈現活性的酸鹼值範圍廣，且具耐熱之特徵。 關鍵字: HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E7%8E%89%E7%9A%87%E8%8F%87field=KW 玉皇菇 ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E5%87%9D%E9%9B%86%E7%B4%A0field=KW 凝集素 ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E9%86%A3%E8%9B%8B%E7%99%BDfield=KW 醣