荧光标记多重PCR技术的优化研究.PDFVIP

( ) ( ) 山东农业大学学报 自然科学版 , 2008, 39 2 : 243 - 246 Journal of Shandong A gricu ltural U n iversity (N atu ral Science) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 荧光标记多重 PCR 技术的优化研究 1 2 1 1 1 1 李荣岭 ,解相林 ,郭彦斌 ,董彬 ,崔志峰 ,王慧 ( 1. 山东农业大学动物科技学院 , 山东 泰安 　27 10 18; 2. 山东日照职业技术学院水产系 , 山东 日照 　276826) 摘要 :为了增强微卫星标记检测遗传多样性的图谱清晰度 ; 同时 ,增强不同引物之间扩增条件的一致性和提高工作 效率 ,我们建立并优化了荧光标记多重 PCR 技术 。结果证明:通过这种方法可以显著提高条带的判别效率 ;增强图 谱的清晰度 ; 由于减小了不同引物之间扩增条件的差异 ,可使不同的引物扩增图谱放在一起进行综合分析 。另外 用 AB I 3 100序列分析仪来分析微卫星扩增产物 ,大大减少了工作量 ,提高了判断基因型的准确性 。本文以中国黄 牛的遗传多样性检测为例 , 比较了荧光多重 PCR 技术的优缺点和限制因素 。 关键词 :多重 PCR;序列分析仪 ;微卫星标记 ;遗传多态性 中图分类号 : F 301. 23　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1000 - 2324 (2008) 02 - 0243 - 04 O PT IM ISM O F THE M UL T IOL ES PCR W I TH THE FL UO RESCENCE M I CRO SA TELL I TE M A RKER 1 2 1 1 1 1 L I Rong - ling , X I E X iang - lin , GUO Yan - b in , DON G B in , CU I Zh i - feng , WAN G Hu i ( 1. College of An im al Science and Technology, Shandong A gricu ltu ral Un iversity, Taian 27 10 18, Ch ina; 2. D ep artm ent of Fish ing, R izhao Occup ation Techn ique College, R izhao 276826 , Ch ina. ) A b stract: In order to enhance the clarity and the efficiency of the m icro satellite m arker, we u sed m u ltip lex PCR in exam ination of m icro satellite m arker and fluore scence p rim ers. The re su lt p roved it wa s trual and m ade the re su lt more cred ib le. A nd AB I 3 100 sequencer can also increa se veracity of exam ination. Both the two m ean s can greatly increa se efficiency and accu racy of m icro satellite m arker. Th is article d iscu