超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质-分析化学.PDFVIP

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2019-02-09 发布于天津
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超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质-分析化学.PDF

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超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质-分析化学

38 ( FENXIHUAXUE) 5 2010 5 Ch inese Journal of Analytical Chem istry 663~ 667 DO I: 10. 3724 / SP. J. 1096. 2010. 00663 Urea-Free 1 * 1 2 1 1 2 李雅萍李友元周新文陈长华张嗣良杨芃原 1 ( , 200237) 2 (, 200032) - , , ; U rea-Free , 10 m in Urea-Free 90 15 m in, 15 s 3( C ), 25 m in, ; ; ; ; 1 [ 1] , -- , , , , [ 2] [ 3~ 8] Capelo Park [ 9] , , [ 10] , ; , , 2 2. 1 700 MALD I-TOF-M S ( AXIMA Q IT, ), JY92-II ( ); DL-180A (); UP50H (H ielscher); GDS-8000(UVP); DY-A ( ) ( Proteom icsgrade) SigmaSDS- PAGE (M erck) (TaKaR a) 2. 2 2. 2. 1 25 mmol/L NH HCO 20 mmol/L ( DTT ) 3 100 mmol/L ( IAA ), 20 g/L 2. 2. 2 : 16 mol/L 20 mmol/L DTT , DTT 8mol/L 10 mmol/L; 37 1 h; 100 mmol/L IAA , IAA DTT 5, 5 m in: 90 15 m inU rea-free: , DTT IAA 2009-10-20; 2009-12-11 (No. 2008BA I63B01)(No. 206020 ) * E-m ail: yyli@ ecu st. edu. cn 38 66 , ; : ( 180W, 0/60 kH z) , 2. 2. 3 100 L 0. 1 g /L(w () w () = 01), ( 1): 37 12 h( 2): , 5 s 5 s , 2 mm 2~ 3m in, 2. 2. 4 SDS% 1 % , , ( IOD) ( Relative percentage of protein d igestion, % ) , : IODorigin al - IODd igested RPPD = 100% ( 1) IODorig inal , RPPD, IODorig inal IOD , IODd igested