壳聚糖的溶菌酶降解-北京化工大学.PDF

第 29 卷 第 6 期 北 京 化 工 大 学 学 报 Vol. 29 , No. 6 2002 年 JOURNAL OF BEIJ IN G UN IV ERSIT Y OF CHEMICAL TECHNOLO GY 2002 壳聚糖的溶菌酶降解 马 　如 　黄明智 (北京化工大学材料科学与工程学院 , 北京 　100029) 摘 　要 : 用粘度法和还原糖法研究了溶菌酶降解壳聚糖过程中温度 、p H 值 、时间、酶浓度 、底物浓度以及金属离子 对降解速度的影响 。比较合适的降解条件是 :温度 45 ℃,p H 值 50 ,适当增大酶浓度和底物浓度能够加速壳聚糖 的降解 ,在一定的底物浓度下溶菌酶降解壳聚糖的反应不遵循简单的一级反应动力学 。一定浓度的 Cu2 + 、Zn2 + 、 Ba2 + 、Cr3 + 能够促进壳聚糖在溶菌酶作用下的降解 ,而 K + 、Ca2 + 和高浓度的 Zn2 + 会抑制酶活力的发挥 。 关键词 : 壳聚糖 ;溶菌酶 ; 降解 中图分类号 : O6361 ; O6298 13 　仪 　器 引　言 ZD2 型自动 电位滴定计 : 上海第二分析仪器 壳聚糖是由D氨基葡萄糖和 D乙酰基氨基葡 厂 ;乌 氏粘度计 : 3 mL ,05 ～06 mm ,100 ～120 s ; 萄糖两种结构单元组成的线性多糖 。壳聚糖只能溶 89HW1 型恒温磁力搅拌器 :浙江乐成电器厂 ; 752 解于某些酸的溶液中 ,但不能直接溶解于水 。壳聚 紫外可见光栅分光光度计 :北京光学仪器厂 。 糖的降解产物 ———低聚壳聚糖具有优良的水溶性和 14 　酶活力测定[6 ] [1～3 ] 在 1 L 05 mol/ L 的Na CO 溶液中溶解 0165 生物活性 。因此 ,研究壳聚糖的降解方法 , 并 2 3 将其分子量控制在一定范围内具有实际意义 。 g 铁氰化钾配成显色剂 ,存放于棕色瓶中。在试管 酶法降解壳聚糖被认为是制备低聚壳聚糖的一 中加入 2 mL 经溶菌酶降解的壳聚糖溶液 ,与 3 mL 种很有前途的方法 。酶法降解要比酸降解的反应条 显色剂混合 ,摇匀 ,用铝箔封 口,在沸水浴中煮沸 15 件温和 ,但是壳聚糖的专一性酶价格较高 ,工业上使 min 后冷却 。在 420 nm 波长下测吸光度 A ,再测出 用受到限制 。 2 mL 溶剂加 3 mL 显色剂的吸光度 A ′作为空白值 。 Δ Δ 溶菌酶在工业上应用较为广泛 。常用的制剂是 计算出 A = A ′- A ,用 A 表示溶菌酶的相对酶 由鸡蛋白制取的。近几年已经有人研究了用鸡蛋白 活性 。 和人体溶菌酶对壳聚糖的降解情况[4 ] 。本文系统 15 　还原糖浓度测定 α 地研究了这种非专一性酶降解壳聚糖的催化特性 。 作出 氨基葡萄糖溶液在 420 nm 下的吸光度 ( A ) 与浓度关系的标准曲线 。应用该曲线即可查出 1 　实验部分