双酚A葡萄糖醛酸苷的高效制备-应用生态学报.PDF

Vol.35 高等 学校 化 学 学报 No.2 2014年2月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 314 ~318 doi:10.7503/ cjc 摇 摇 双酚A葡萄糖醛酸苷的高效制备 1 2 2 1 2 1 1 1 杨摇 刚 ,朱亮亮 , 吕摇 侠 ,吴大畅 ,夏杨柳 ,马骁驰 ,辛摇 毅 ,侯摇 洁 (1. 大连医科大学生物技术系,大连116044;2. 中国科学院大连化学物理研究所,大连116023) 摘要摇 采用鼠肝微粒体(RLM)生物转化法,利用正交实验在体外实现了双酚A(BPA)向双酚A葡萄糖醛酸 苷(BPA鄄G)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C WAX及固相萃取技术实现了BPA鄄G 的高效富集与 18 纯化,并对产物进行了结构表征. 关键词摇 双酚A;鼠肝微粒体;双酚A葡萄糖醛酸苷;固相萃取 + 中图分类号摇 O625郾31 2;TS206摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A 双酚A(BPA),化学名2,2鄄二(4鄄羟基苯基)丙烷,已被广泛用于碳酸聚酯、环氧树脂和聚苯乙烯 [1] 树脂,以及杀真菌剂、抗氧化剂和染料等的生产 . 双酚A 能从食品包装容器、塑料薄膜或饮料瓶等 [2] 塑料制品中扩散出来引起环境和食物污染 . 近年来,随着含双酚A 塑料制品的广泛应用,人们对其 [3] 引发的污染非常关注 . 研究发现,双酚A具有雌激素活性,能干扰机体正常的内源性代谢;它也可能是雌性激素受体激 [3~6] 活剂或雄性激素受体拮抗剂,会对雄性生殖机能产生影响 . 双酚A在人体及动物体内可被肝脏中 表达的葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)代谢并生成双酚A鄄O鄄葡萄糖醛酸结合物,再经由胆汁和尿液排出体 [6,7] [8~10] 外 . 双酚A在体内的代谢速率相对较快,且经原型排出的比例极低 . 虽然葡萄糖醛酸代谢在 机体内双酚A 的代谢清除发挥主导作用[11,12] ,但经由该代谢途径形成的主要代谢产物双酚A鄄O鄄葡萄 糖醛酸结合物(BPA鄄G)对内源性代谢的影响及其它相关毒理学研究尚未见报道. 这是因为BPA鄄G单 体的制备相对困难,该化合物一直未实现商业化生产,这严重限制了对其深入研究. 因此,有必要开 发一种高效制备BPA鄄G的方法. 尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(UGTs)是人体最重要的域相代谢酶,它可将脲苷酰二磷酸葡萄糖醛酸 (UDPGA)上的葡萄糖醛酸基团转移到底物的亲核基团如羟基、氨基和巯基等之上,进而生成相应的葡 萄糖醛酸结合物,反应过程如Scheme 1所示. 肝脏中的UGT酶在多种内源性及外源性化合物的葡萄 糖醛酸化结合代谢中发挥着重要作用,这是因为肝脏不仅是UGT酶的主要分布器官,同时还高表达多 Scheme 1摇 Glucuronidation pathway catalyzed by UGTs 收稿日期:2013鄄07鄄04郾 基金项目:国家自然科学基金(批准号81273590、国家“九七三冶计划项目(批准号:2013CB53180