克百威残留放射免疫分析方法研究.PDFVIP

320 核 农 学 报 　2002 ,16 (5) :320～324 　 Acta Agriculturae N ucleatae Sinica ( ) 文章编号 2002 克百威残留放射免疫分析方法研究 1 2 2 胡秀卿 　朱国念 　徐步进 ( 1 浙江省农业科学院植物保护研究所 ,浙江杭州 　310021 ;2 浙江大学农业与生物技术学院 ,浙江杭州 　310009) 摘 　要 :通过活化酯法与牛血清蛋白联接 ,制备出较高活性的人工抗原 , 以此来免疫兔 14 子制备抗克百威的多克隆抗体 。选择适宜的反应条件 , 以 C克百威建立了克百威 放射免疫测定法 。该方法对克百威标准品的最低检测量为 0175ngml ,线性检测范 围为 0256～40000ngml ,I 值为 6500ngml 。在线性检测范围内,添加不同浓度克 50 百威的蔬菜样品检测的批内、批间变异系数均小于 10 % 。在甘蓝菜样品中的添加回 收率试验回收率为 930 %～1040 % ,变异系数为 43 %～115 % 。所得克百威抗体 特异性强 ,与丁硫克百威的交叉反应率为 915 % ,与呋喃酚的交叉反应率为 529 % , 与供试的其它 3 种氨基甲酸酯类的交叉反应率均小于 05 % 。 关键词 :克百威 ;RIA ;残留 ( ) 克百威 呋喃丹 是一种内吸性的N甲基氨基甲酸酯类高毒杀虫剂 ,主要用于防治各类农 作物的土壤害虫 、叶食类昆虫及线虫 。本研究试图建立蔬菜中克百威残留的放射免疫分析方 法 , 以便对蔬菜中克百威残留进行批量快速监测 ,并进一步应用于环境样品监测 。 1 　材料与方法 11 　试验材料 111 　仪器设备 　液体闪烁计数仪(Wallac 1400 DSA) , KJ Ⅱ型离心机 , 高分辨核磁共振仪 ( ) ( ) ( ) ( AM500 ,Bruker ,红外测定仪 IR435 , Shimadzu ,紫外分光光度计 Beckman Du7 ,质谱仪 Es ) ( ) quire ALC MSn , Bruker ,酶联免疫测定仪 5 Ⅱ型 ,上海 ( ) 112 　化学试剂与药品 　7羟基呋喃酚 2 ,2二甲基2 ,3二氢7羟基苯并呋喃酚 由江苏省 ( ) ( ) 铜山农药厂提供 ;氨基己酸 、N羟基琥珀酰亚胺 NHS 、二环己基碳二亚胺 DCC 、N ,N二甲基 ( ) ( ) ( ) 甲酰胺 DMF 、牛血清白蛋白 BSA 、卵清蛋白 OVA 、弗氏完全佐剂 、弗氏不完全佐剂均购 自