微小RNA—let一7a对黑素瘤细胞系A375细胞凋亡的影响.PDFVIP

8 575 生堡废魅叠塞壶堑iQ生S旦筮垒3鲞笙8翅￡丛n』堕婴§垃!，△丛牲坠垫!Q，y丛：鲍，盟Q1 ·论著- 微小RNA—let一7a对黑素瘤细胞系 A375细胞凋亡的影响 王震英张捷王焱刘毅姜祥群曾学思孙建方 【摘要】目的研究微小RNA(mieroRNA)一let一7a对黑素瘤细胞系A375细胞凋亡的影响及其作用 机制。方法采用实时荧光定量PCR法(TaqMan探针法)检测microRNA—let一7a在A375细胞及黑素细胞 的表达差异；然后用microRNA—let一7a的模拟物转染A375细胞，流式细胞仪检测其凋亡的改变；最后采 用Western印迹检测转染后半胱天冬酶一3(caspase一3)蛋白的变化。结果与黑素细胞相比，microRNA— let-7a在A375细胞中表达下降了0．462倍；采用microRNA—let一7a的模拟物转染后，与阴性对照(细胞凋 亡率16．9％)相比，A375细胞凋亡(细胞凋亡率47．4％)增加；转染后caspase一3蛋白表达下调。结论 microRNA—let一7a可促进黑素瘤细胞系A375的凋亡，同时下调caspase一3蛋白的表达。 【关键词】黑色素瘤；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3；细胞系，肿瘤；microRNA—let一7a EffectofmicroRNA．1et．7aon inmelanomacelllineA375 apoptosis 耽ⅣG压en-ying,Z枞ⅣG胞 WANG Yan，uUYi，JIANGlff-qun．zENGXue-si,SUNJian-fang．InstituteofDermatology,ChhTeseAcademy ofMe击eMSciencesand UnionMe击cM Peking College,Nanfing210042,China anth017．SUN CorrespondingJian-fang,Emml：fangmin5758@yahoo．corn．cn To theeffectofmicmRNA—let-7aon inmelanomacellline 【Abstract】0bjectiveinvestigate apoptosis A375 The of was in and anditsmechanism．Methods microRNA．1et．7adetectedA375cells expression real．timePCR．Then．microRNA．1et．7amimicsWastransfectedintoA375cellsfollowedthe melanocytesby by measurementof and flow andWestern apoptosiscaspase-3proteinexpressionby c”ometry blotting,respectively． ResultsThe levelofmicroRNA—let．7awasreduced0．462foldsinA375cells with expression by eompared rateWas47．4％inA375cellstransfeetedwitllmicroRNA．1et．7a melanocytes．The mimics．signifi． apoptosis thanthatinuntransfectedA375ce