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基于高效液相色谱法测定长白猪肌肉组织和肠道内容物-广东农业科学
98 广东农业科学… 2015年第18期
基于高效液相色谱法测定长白猪肌肉组织
和肠道内容物中腺苷酸含量
孔 谦,晏石娟,吕 琪,黄建峰,陈 庄
(广东省农科院农业生物基因研究中心,广东…广州………510640)
摘 要:腺苷酸是能量代谢的载体,为了更好地研究长白猪肌肉组织和肠道内容物中能量代谢的差异,
建立了一种快速检测猪肌肉组织和肠道内容物中腺苷酸含量的高效液相色谱(HPLC)分析方法。色谱条件
为:Waters…Symmetry…C18反相色谱柱(250…mm×4.6…mm,5…μm);流动相为甲醇-50…mmol/L磷酸二氢钾缓冲
液(pH6.5),其体积比为9∶91;流速0.5…mL/min;柱温30(±1)℃;紫外检测波长259…nm,进样体积10…
μL时,在0.1~100…mg/L浓度范围内,ATP、ADP和AMP质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系
数分别为0.999、0.998和0.996,检出限(LOD, ≥3)分别为0.0001、0.004、0.004…mg/L,定量限(LOQ,
S/N
S/N ≥10)分别为0.002、0.02、0.02…mg/L,且平均回收率分别为92.00%~99.05%、100.77%~104.48%和
110.84%~113.72%,相对标准偏差(RSD)为0.29%~1.02%、0.33%~1.65%和0.69%~1.92%,整个过程可在10…
min内完成。该方法具有快速、准确、灵敏性高、重复性好等特点,可用于猪肌肉组织和肠道内容物中ATP、
ADP和AMP含量的检测以及能量代谢研究。
关键词:高效液相色谱;ATP;AMP;ADP;能量代谢
中图分类号:O657.7… … … … … 文献标识码:A… … … … … 文章编号:1004-874X(2015)18-0098-05
Determination of adenosines in muscle and intestinal
digesta of Landrace pigs by high preformance
liquid chromatography
KONG…Qian,YAN…Shi-juan,LYU…Qi,HUANG…Jian-feng,CHEN…Zhuang
(Agrobiological Gene Research Center ,Guangdong Academy of Agricultural Sciences ,Guangzhou 510640 ,China )
Abstract :Adenosines…are…the…vector…of…energy…metabolism.…The…aim…of…this…work…was…to…establish…a…method…
for…the…differences…of…energy…metabolism…from…the…pig…muscle…and…intestinal…digesta…by…high…preformance…liquid…
chromatography(HPLC).When…the…analytic…condition…of…HPLC…in…feed…was…a…reverse…phase…Waters…C18…column
(250…mm×4.6…mm,5…μm),mobile…phase…was…methanol(V)/…50mmol/L…KH2PO…buffer…solution(pH6.5)4
(V…9∶91)…with…the…flow…rate…of…0.5…mL/min,the…column…temperature…was…at…30(±1)℃,the…detection…
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