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试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 3.2 体外受精和早期胚胎培养 一、从试管牛说起 二、体外受精 1.卵母细胞的采集和培养 2.精子细胞的采集和获能 3.体外受精过程 三、胚胎的早期培养 1.概念:应用人工创造条件,对获取的 早期胚胎进行体外培养。 2.培养液成分: 第二节 体外受精和早 期胚胎培养 榜山中学 杨美山 2013.5.14 1988年3月10日我国首例试管婴儿 “神州试管婴儿之母”张丽珠教授和我国大陆首例试管婴儿郑萌珠 试管婴儿 1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。 根据资料回答下列问题: 1.资料上用到了什么生物技术? 试管婴儿技术(包括体外受精、胚胎体外培养)和胚胎移植技术。 2.试管婴儿和母亲正常怀孕,生产的过程有何异同? 相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。 存在困难: 1、引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元。 2、牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生 只能生育四五次。(牛的妊娠期约280天) 讨论1:是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖?为什么? 牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。 公牛产生的精子数目就更多了 (精子数:50亿/mL) 理论基础: 讨论2:如何让引进的良种牛快速大量的繁殖? 快速繁殖动物优良品种 目的: 技术手段: 体外受精和早期胚胎培养 试管动物技术的三个基本操作环节: 第一步:体外受精 第二步:胚胎的早期培养 第三步:胚胎移植 精子 卵子 受精卵 早期胚胎 幼体 ① ② ③ 新个体 哺乳动物个体发育过程 试管 动物 思考:子代数目的多少取决于精子数还是卵子数? 方法1:给供体注射促性腺激素,使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子(超数排卵),之后从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 方法2-1:从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞 借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等的引导,从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫,同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 方法2-2:从活体卵巢中采集卵母细胞 比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同,为什么? 比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同,为什么? 2.精子的收集和获能 1)收集的方法: 假阴道法,手握法和电刺激等 2)获能处理: 培养法:把精子放入获能液中。 (啮齿动物、家兔和猪) 化学法:把精子放入一定浓度肝素等溶液中。 (牛、羊) 3.受精 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 离心的目的是什么? 卵母细胞的培养的目的是什么? CO2培养箱 二、胚胎的早期培养 复习:动物细胞培养的条件是什么? 二、胚胎的早期培养 发育培养液成分 : 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等. 牛、羊:桑椹胚或囊胚 小鼠、家兔:卵裂期或囊胚 试管婴儿:8个或16个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植。 注意:不同动物胚胎移植的时间不同 为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞,不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉,还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看这个想法可行吗? 奇思妙想 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 保存剩余的卵子和精子的方法是什么? 试管动物 与 克隆动物相比 生殖方式: 技术手段: 遗传规律: 有性生殖 无性生殖 核移植技术、 胚胎移植 遵循 无 体外受精 胚胎移植 胚胎移植 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 受体牛 良种犊
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