降脂消毒饮对大鼠酒精性脂肪肝并肠源性内毒素血症模型的干预作用及机制研究-方剂学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 中 文 摘 要 目的：建立 SD 大鼠酒精性脂肪肝（AFL）并肠源性内毒素血症（IETM）模型，并 研究降脂消毒饮对 AFL 并 IETM 模型的治疗作用、保护作用及部分机制。 方法：①建立 AFL 并 IETM 模型：模型组、乳果糖组依次以 30%、40%、50%的酒精 15m1·Kg-1·d-1 按周递增灌胃，每日早晚分两次灌胃，同时给予 5%的酒精为唯一 饮料，自第 3 周乳果糖组增加乳果糖（1.35g·Kg-1·d-1）灌胃，正常组、模型组 给予等体积生理盐水，时间均为 7 周。并自第 3 周末开始每组各抽取 6 只，观察 肝指数、血清门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血清 D 乳 酸（D-LAC）和二胺氧化酶（DAO）、血浆内毒素（LPS）、肝脏病理形态学指标。② 降脂消毒饮对 AFL 并 IETM 模型的治疗作用、保护作用及量效关系：建立大鼠 AFL 并 IETM 动物模型。并分别在中断酒精刺激和继续酒精刺激的情况下，以降脂消毒 饮半量（7.88g·kg-1·d-1）、常量（15.75g·kg-1·d-1）、2 倍量（31.5g·kg-1·d-1）、 4 倍量（63g·kg-1·d-1）、8 倍量（126g·kg-1·d-1）、护肝片（0.39g·kg-1·d-1）、 乳果糖（1.35g·Kg-1·d-1）进行干预。观察肝指数、血清 AST 和 ALT、肝脏组织 甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）、血浆 LPS、肝脏病理形态学指标。③降脂消毒 饮对 AFL 并 IETM 模型保护作用的机制：建立大鼠 AFL 并 IETM 模型。在继续酒精 刺激的情况下，以降脂消毒饮 4 倍的剂量（63g·kg-1·d-1）进行干预。观察指标 有血清 AST 和 ALT、血浆 LPS、血清 D-LAC 和 DAO、白细胞分化抗原 14（CD14）基 因和蛋白表达、TOLL 样受体 4（TLR4）基因和蛋白表达、清道夫受体（SR）基因 和蛋白表达、肝组织和血清白细胞介素 1（IL-1）、白细胞介素 6（IL-6）、白细胞 介素 8（IL-8）、白细胞介素 10（IL-10）、肿瘤坏死因子 a（TNF-a）、γ 干扰素 （IFN-γ）。④降脂消毒饮对高脂饮食诱导的脂肪肝动物模型的治疗作用、保护作 用：以高脂饲料喂养诱导大鼠脂肪肝动物模型，并分别在中断高脂饲料和继续高 脂饲料喂养的情况 下，以药物降脂消 毒饮（ 15.75g · kg-1 · d-1 ）、 血 脂 康 （0.14g·kg-1·d-1）、辛伐他汀（0.9mg·kg-1·d-1）进行干预。观察指标有肝指数、 血清 AST 和 ALT、肝脏组织和血清 TG 和 TC、肝脏病理形态学指标。 结果：①造模 5 周模型组各项指标符合 AFL 的要求，同时血浆 LPS 水平明显高于 - 1 - 正常组（P﹤0.05），且模型组血浆 LPS 水平与肠黏膜通透性（血清 D-LAC 和 DAO）、 肝损伤程度（血清 AST、ALT）表现一致。②治疗作用及量效关系：降脂消毒饮常 量组各指标的改善总体上优于护肝片组、乳果糖组；2 倍组、4 倍组、8 倍组的治 疗作用优于其它组，而 2 倍组、4 倍组、8 倍组总体疗效相当；在不超过 2 倍剂量 时，随着剂量增加，各指标也相应地改善。保护作用及量效关系：降脂消毒饮常 量组各指标的改善总体上优于护肝片组、乳果糖组；4 倍组、8 倍组的保护作用优 于其它组，4 倍组、8 倍组疗效相当；在 8 倍剂量范围内，随着降脂消毒饮剂量的 增加，各指表也相应地改善。③模型组和 4 倍组血清 D-LAC、DAO 水平的变化与血 浆 LPS、血清 AST 和 ALT 水平变化一致；模型组和 4 倍组 CD14、TLR4 基因水平和 蛋白表达、及 IL-1、IL-6、IL-8、TNF-a、IFN-γ 水平与血浆 LPS、血清 AST 和 ALT 水平变化一致，而 SR 基因和蛋白表达及 IL-10 水平与血浆 LPS、血清 AST 和 ALT 变化相反。④降脂消毒饮组对高脂饮食诱导的脂肪肝模型各指标的改善总体 上优于血脂康组、辛伐他汀组。 结论：①以上述方法 5 周可成功建立 AFL 并 IETM 动物模型；各种原因导致肠黏膜 通透性的升高是血液中 LPS 升高的主因，IETM 在酒精性肝损伤中可能具有重要作 用；通过减少肠道对 LPS 的吸收，抑制血液中 LPS 的水平，可一定程度上抑制内 毒素性肝损伤。②在中止酒精刺激和继续酒精刺激的情况下，降脂消毒饮对大鼠 AFL 并 IETM 都具有良好的疗效，中药复方降脂消毒饮有可能开发成为一种新型的 治疗 AFL 并 IETM 和防止其进一步进展的有效药物；降脂消毒饮 2 倍剂量为