角膜内皮移植相关技术的系列研究-临床医学 眼科学专业论文.docxVIP

邵应峰博士论文 邵应峰博士论文 导师陈家祺 中文摘要 角膜内皮细胞仍是一个世界性的难题．这主要是由于可用于实验研究的人角簟内 皮材料十分有限。难以广泛开展实验研究。同时，人们对人角膜内皮细胞的生长 调控知之甚少。随着角膜内皮移植临床手术技术的日趋成熟，有关人角膜内皮细 胞生长调控的研究，己成为现实的迫切需要和技术关键。 角膜内皮移植的另一个热点问题是研制适当的角膜内皮细胞的载体。很显 然，单层的角膜内皮细胞十分纤薄和脆弱，仅仅对其进行抓取都难以实施，对其 进行手术操作更是十分困难的。因此必须将角膜内皮细胞种植于适当载体，角膜 内皮细胞移植手术才具有可操作性。理想的角膜内皮细胞载体应当具有一定的强 度、有利于内皮细胞生长和贴附、无毒、无抗原性、透明或移植以后可快速恢复 透明、廉价易得。羊膜、人工合成的高分子材料、冰冻或脱水的角膜基质等做为 角膜内皮细胞载体均曾见诸报道。但是，更为理想的载体材料仍然值得研究和探 讨。 移植排斥反应移植是器官和组织细胞移植所面临的巨大障碍。穿透性角膜移 植术后，可能发生上皮型、基质型、内皮型反应。其中尤以内皮型排斥反应的后 果最为严重。尽管角膜内皮移植减少了移植的外来抗原物质，可以避免上皮型排 斥反应和减少基质型排斥反应，但是，角膜内皮在角膜组织中具有最强的抗原性， 仍然可以发生内皮型排斥反应，并且后果同样严重。如何降低角膜内皮细胞移植 后的排斥反应亦是人们无法回避的问题。 针对以上角膜内皮移植技术中面临的问题，本项研究进行了以下几方面内容 的研究：1．角膜内皮移植临床手术技术的初步探讨。2．人角膜内皮细胞体外生长 调控的实验研究。3．以脱细胞角膜基质为载体体外构建角膜内皮植片的可行性研 究。4．用SiRNA技术抑制角膜MHC抗原表达的实验研究。旨在为最终建立成熟 的利用体外培养的角膜内皮细胞进行角膜内皮细胞移植技术提供临床和实验基 础。 第一部分角膜内皮移植临床手术技术的初步探讨 一、用微型刀进行的角膜深板层内皮移植的三年临床观察 III 邵应峰博士论文 邵应峰博士论文 导师陈家祺 中文摘要 目的 探讨用微型自动角膜板层刀进行深板层角膜内皮移植术(mierokeratome associated deep lamellar endothelial keratoplasty，MDLEK)的临床效果和不良反 应。 方法 1．研究对象：2002年元月～2002年3月期间，在中山大学中山眼科中心住 院治疗的六名角膜内皮失代偿患者。 2．手术方法 2．1供体角膜基质片的制各：先用海绵拭子小一Ii,地将供体眼角膜上皮抹去。 用微型自动角膜板层刀切除一个前角膜组织瓣，直径9～lO．5mm，厚度为 3001am～3501am，然后用刀片沿角膜缘切开前房，用角膜剪沿角巩膜缘将剩余的 供体角巩膜组织片剪下，此内皮向上置于移植片壅i坦枕上，用直径6．75mm的环 钻切取供体角膜的内皮、基质移植片。 2．2植床制作：先用海绵拭子小心地将患眼角膜上皮抹去。用MLK在患者 角膜表面切出1个带蒂的前角膜组织瓣，直径9～lo．5mm，厚300“m～350肛m。用 直径6．5mm的环钻切除中央剩余的角膜组织(移植片比移植床口径大0．25mm)， 包括后板层、后弹力层和角膜内皮。前房注入黏弹剂。 2_3移植：将供体角膜基质片内皮向下植入植床。用10-0尼龙线间断缝合8～ 16针，将植片固定于植床，缝合达水密状态，用平衡盐溶液重建前房。将带蒂的 前角膜组织瓣复位并严密对合，用10．0尼龙线间断缝合4～6针。 3．术后处理与随访 术后处理同穿透性角膜移植常规，术后2周拆除角膜组织瓣缝线。于术后1 个月开始，每月对患者进行随访。随访内容包括裂隙灯显微镜检查、角膜厚度、 角膜曲率、角膜地形图、角膜内皮显微镜检查等。 结果 术后3个月5名患者最佳校正视力较术前明显提高，最高者可达0．7，并在 以后的随访中保持稳定；术后3个月患者平均散光为2．04_I-1．19D，以后进一步减 退；角膜中央厚度于术后3个月已接近正常水平，此后无显著变化；术后角膜内 邵应峰博士论文 邵应峰博士论文 导师陈家祺 中文摘要 皮密度逐步下降，其下降速率与穿透性角膜移植相仿；共焦显微镜观察发现术后 1年，创面附近的角膜基质细胞已趋于正常，且角膜中央视轴区无明显瘢痕。随 访期内未发现角膜深层缝线导致新生血管或引起排异反应。 结论 用微型自动角膜板层刀进行深板层角膜内皮移植术用以治疗角膜内皮失代 偿安全、实用；术后恢复视力时间短；术后散光小；术后板层创面愈合快，光学 性能满意