胶质瘤顺铂化疗后DNA损伤检控点ATM基因的表达变化及ATM基因慢病毒RNAi载体构建-外科学(神经外科)专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 英文缩略词表………………………………………………………………………1 中文摘要……………………………………………………………………………2 英文摘要……………………………………………………………………………4 第一部分……………………………………………………………………………7 前 言…………………………………………………………………………… 7 材料和方法………………………………………………………………………8 结 果……………………………………………………………………………16 讨 论……………………………………………………………………………20 第二部分………………………………………………………………………… 24 前 言……………………………………………………………………………24 材料和方法…………………………………………………………………… 25 结 果……………………………………………………………………………35 讨 论……………………………………………………………………………44 结 论………………………………………………………………………………47 参考文献 …………………………………………………………………………48 综 述 …………………………………………………………………………… 55 本课题获得科研资助项目 ………………………………………………………63 攻读学位期间发表论文情况 ……………………………………………………64 致 谢………………………………………………………………………………65 2 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文译名 ATM ataxia-telangiectasia mutated 毛细血管扩张共济失调突变基因 AKT serine/ threonine kinase 丝/苏氨酸蛋白激酶基因 CCND1 cyclinD1 细胞周期蛋白 D1 Cdc25C cell division cycle 25C 细胞分裂周期蛋白 25C Chkl/2 checkpoint kinase 1/2 检控点激酶 1/2 DMSO DEPC dimethyl sulfoxide diethypyrocarbonate 二甲基亚砜 焦碳酸二乙酯 DMEM dulbecco’s modified eagle’S medium DMEM 培养基 Dicer dsRNA specific endonuclease dsRNA 特异性核酸内切酶 dsRNA double-stranded RNA 双链 RNA EDTA ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 EGFP enhanced green fluorescent protein 加强绿色荧光蛋白 LB Luria-Bertani LB 培养基 mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 NFkB nuclear factor-KB 核因子.K B PI3K phosphatidyl-inosital-3-kinase 磷脂酰肌醇 3 激酶 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 RNAi RNA interference RNA 干扰 RT-PCR Real-time PCR 实时 PCR shRNA small hairpin RNA 小发夹 RNA siRNA small interfering RNA 小干扰 RNA 1 胶质瘤顺铂化疗后 DNA 损伤检控点 ATM 基因的表达变化及 ATM 基因慢 病毒 RNAi 载体构建 中文摘要 第一部分：化疗前后不同时期胶质瘤组织中 ATM 的表达变化和意义 目的：探索化疗前后不同时期胶质瘤组织中 ATM 表达及变化规律，为确定 分子靶向干预的最佳时机提供依据。 方法：利用人胶质瘤 U251 细胞裸鼠皮下异位移植制作胶质瘤模型，通过顺 铂对荷瘤裸鼠进行化疗(5mg／kg／d 连续腹腔注射 4—5 天)，建立胶质瘤化疗和 化疗后进展模型。利用功能分类基因芯片系统检测化疗前后不同时期胶质瘤组织 中 ATM 的表达情况,并利用实时定量 RT-PCR 和免疫组织化学进行验证。 结果：结果发现 ATM 在化疗前后不同时期表达出现明显变化，其中在化疗 结束时表达显著增强，在化疗后肿瘤消退至最小时 ATM 表达又明显降低，然而在 胶质瘤进展时其表达再次明显增强，定量 RT-PCR 和免疫组化结果与此相一致。 结论：化疗前后不同时期胶质瘤组织中 ATM 的表达呈动态变化，化疗结束 时和肿瘤进展期表达明显上调。 关键词: 神经胶质瘤；化学治疗；A