结直肠癌中RIP3基因的表达及其功能研究-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 全文总结 ··········································································································· 48 参考文献 ··········································································································· 49 致 谢 ··············································································································· 56 攻读学位期间发表的学术论文 ······································································ 57 原创性声明 ······································································································· 58 泰山医学院硕士学位论文 泰山医学院硕士学位论文 结直肠癌中 RIP3 基因的表达及其功能研究 研究生：冯晓冬 专 业：病理学与病理生理学 导 师：王学春 教授 中文摘要 目的 本研究旨在探讨 RIP3 基因在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理指标之间的 关系，并进一步探查其在结直肠癌细胞中发挥的功能，有助于揭示结直肠癌发生发展 的分子生物学机制。 研究方法 1. 采用实时定量荧光 PCR（Real-time PCR）、蛋白印记法（Western blot）检测 RIP3 在结直肠癌组织及其配对正常膜黏组织中 mRNA 及蛋白表达差异。 2. 采用免疫组织化学（Immunohistochemistry）检测结直肠癌及其配对正常黏膜 组织 RIP3 基因的蛋白表达水平，并通过 Kaplan-Meier 及 Cox 比例风险模型分析 RIP3 在结直肠癌中的表达差异与患者术后生存率、复发率之间的关系。 3. 通过构建 RIP3 基因过表达质粒，体外转染结直肠癌细胞。研究 RIP3 过表达 对结直肠癌 RKO 细胞的细胞增殖、平板克隆集落形成、侵袭与转移、诱导凋亡等生 物学功能的影响。探讨过表达 RIP3 基因对结直肠癌细胞生物学功能的影响。 结果 1. Real-time PCR 结果显示肿瘤组织中 RIP3 mRNA 表达水平低于正常组织 2 倍 以上的达 60.5%（23/38）。Western blot 结果提示 RIP3 蛋白在结直肠癌组织中的表达 低于配对正常组织中的表达。 2. 免疫组织化学结果显示 RIP3 表达率与患者肿瘤大小(P=0.027), 肿瘤远处转移 (P=0.016) 与 AJCC 分期 (P=0.002)高度相关。Kaplan-Meier 和 Cox 比例风险模型显 示 RIP3 阴性表达病例的总生存率及无病生存率均明显低于 RIP3 阳性表达病例 (P=0.004, P=0.015)。 3. 体外细胞功能试验发现，结直肠癌 RKO 细胞过表达 RIP3 能显著抑制细胞的 增殖、集落形成、侵袭与转移能力，通过流式细胞技术进一步分析发现 RIP3 过表达 细胞凋亡比例明显升高。 1 结论 1. 结直肠癌中 RIP3 mRNA 及蛋白表达水平较正常配对黏膜上皮组织表达显著 降低。 2. RIP3 表达降低与一系列临床病理指标，如肿瘤大小、肿瘤远处转移与 AJCC 分期呈高度相关，是患者总生存率及无病生存率的有效预测因子。 3. 过表达 RIP3 能明显抑制 RKO 细胞增殖、集落形成、侵袭与转移，并诱导细 胞凋亡。提示 RIP3 可能是结直肠癌新的抑癌基因，对判断预后、研究新型靶向治疗 药物等临床应用提供新的可能性。 关键词：结直肠癌；受体相互作用蛋白 3；分子靶点 2 THE EXPRESSION OF RIP3 AND ITS FUNCTION STUDY IN COLORECTAL CANCER Postgraduate: Feng Xiaodong Major: Pathology and Pathophysiology Supervisor: Professor Wang Xuechun Objectives  ABSTRACT The aim of this study is to discuss the mRNA and protein expression of the R