AFS声力谱仪（声镊）应用案例.PDFVIP

AFS声力谱仪（声镊）应用案例 高精度力学及长度测量 AFS 是对单个生物分子进行高精度力学测量的理想工具。我们在此通过对单个 DNA 分子不同张力程度及 使用AFS 的跟踪软件测量其长度来证明AFS 的高测量精度。 本实验是在被拴在链霉亲和素包裹的聚苯乙烯微球（直径4.5μm ）上的单个DNA 分子（长度8.4 kbps ）上 进行的。 用测量之前已生成的对照表来跟踪微球的高度可达纳米精度。 测量过程中，我们将驱动电压的（正负峰间）幅度从0 Vpp 增加到2.1 Vpp，相应的声学力从0 pN 增加到 15.8 pN。AFS 软件能实时确定在各种力作用下的DNA 长度，以此来探测生物活动，如蛋白质-DNA 的相互 作用。 具有14 位垂直分辨率的信号发生器产生的亚皮牛顿（pN）精度的恒声学力具有数小时的稳定性和亚毫秒 的响应时间。 1 电压 0 Vpp 声力学 0 pN 伸长精度 205.1nm(st.dev.@60Hz) 2 电压 0.6 Vpp 声力学 1.3 pN 伸长精度 18.5nm(st.dev.@60Hz) 3 电压 1.5 Vpp 声力学 8.1 pN 伸长精度 14.0nm(st.dev.@60Hz) 4 电压 2.1Vpp 声力学 15.8pN 伸长精度 12.7nm(st.dev.@60Hz) 并行测量力学性能 AFS 拥有强大独特的功能，能够以高度并行的方式实现单分 子的测量。因为在很多情况下由热扰动引起的复杂状态及随 机的个别状态需要在单个实验中同时测量得到，而AFS 并行 测量功能恰好实现了此要求，这是非常关键的。在这个单分 子的拉力实验中，通过并行测量得到了20 个DNA 分子的力 学参数。 力-拉伸长度曲线 20 个独立DNA 分子的并行拉伸曲线。我们将张力从0.1 pN 增加到48 pN 来记录力学-拉伸长度曲线。在一个可视区里 同时并行地获得曲线。单分子多数量力学测量功能，可以应 用到不同的实验如蛋白质和RNA 伸展和核酸酶处理。 高数据量的键断裂测量 统计分析和高数据量采集对于抗体-抗原相互作用的表征是 至关重要的。由于AFS 多数量分子测试的能力，大量的键可 以并行测试，大大减少了测量时间。 这个实验展示了AFS 能够在单个测量实验中获取一个完整的 251 个单分子Dig:: anti-Dig 键断裂力分布。 断裂力柱状图 251 个Dig::anti-Dig 键，拉伸载荷率为2.3 pN/s，每Dig::anti-Dig 键的断裂力记录下来并绘制成一个断裂力柱状图。此柱状图 在相同条件下的单个实验中得到，保证实验的可靠性和重现 性。AFS 能够应用加载速率跨越几个数量级（10-4 PN / s 到103 PN / s），使之成为高度并行测量动态力学谱的理想工具。 基于AFS 技术的细胞操纵 AFS 技术为科学家提供了来操纵任一物质的独一无二能力，与 悬浮的液体介质相比，密度不同。通过这个方法，力不仅可 以作用于合成微球，也能作用于活体物质本身。