enu与疾病动物模型p学pt课件.pptVIP

所获短尾小鼠属于纵形肢体缺陷，与人类心手综合征（holt-oram syndrome，HOS）属于同一类型，其突变基因与人类TBX5基因高度同源。心手综合征在人类的发病率约为十万分之一。 短尾小鼠无疑是一个很好的骨骼畸形研究的动物模型。 短尾小鼠的模型价值 短尾突变基因（T）的序列鉴定与分析 短尾突变基因序列鉴定与分析技术路线 RT-PCR及巢式PCR 抽提RNA 胶回收测序 测序结果比对 确定突变位点 基因组突变位点鉴定 实 验 方 法 8.5天小鼠胚胎的获取 RNA抽提：参照 RNAR Total RNA Isolation System ( Promega 公司 )的说明书，在超净工作台内进行操作 RT引物设计 逆转录：参照 Invitrogen 公司 SuperScriptTM First-Strand Synthesis System for RT-PCR 试剂盒说明书操作 高保真PCR扩增 PCR产物回收：fastgene 胶回收试剂盒回收。收集滤液,送上海生工测序。 8.5天 B6-St 小鼠胚胎总 RNA RT-PCR扩增产物，得到了 1494 bp 的特异性产物 突变T基因RT-PCR产物电泳图 T基因、突变T基因的cDNA序列与数据库序列的比对 巢式 PCR 验证结果 1：正常小鼠胚胎T基因PCR电泳结果。 2：短尾小鼠胚胎T基因PCR电