对银叶粉蝨致病性之探讨.doc

兩種蟲生真菌(Verticillium lecanii及Beauveria bassiana) 對銀葉粉蝨致病性之探討 Pathogenicity of the entomopathogenic fungi, Verticillium lecanii and Beauveria bassiana, to the silverleaf whitefly, Bemisia argentifolii Bellows Perring. 研究生：陳慧君 Chen, Huei-Jun 指導教授：張念台 Chang, Niaan-Tai 【摘要】 本研究利用二種蟲生真菌菌株探討對銀葉粉蝨（Bemisia argentifolii Bellows ＆ Perring）之致病原因及效果，期能篩選出具致病力之菌株提供粉蝨防治之另一選擇。供試菌株有蠟蚧輪枝菌(Verticillium lecanii) F313、白殭菌(Beauveria bassiana) A1和白殭菌F121三菌株，以不同環境與營養條件測試其生理特性，結果顯示12L:12D光週期處理對三菌株在YPDA培養基上之產孢量為最佳，24L次之，24D最差，產孢量分別為2.17×109、2.01×109和1.3×109conidia/ml，顯示12L:12D處理對菌絲生長及產孢的促進較佳。三個菌株溫度試驗顯示其生長適溫範圍皆不同，F313菌株在20℃下之YPDA培養基上產孢量最佳，而A1和 F121二菌株則在25℃與28℃時的YPDA培養基產孢量較好。室內生物檢定，三個菌株分別以105、106和107 conidia/ml孢子懸浮液感染銀葉粉蝨成蟲，結果以直接噴灑蟲體處理效果較佳，其中107 conidia/ml濃度測試F313菌株之致死率達85.7％為最高，A1次之而F121最差。而利用孢子懸浮液噴灑銀葉粉蝨，F313、A1與F121之LC50分別為3.43×105conidia/ml、6.73×105conidia/ml和1.76×106conidia/ml。另利用APIZYM系統測試不同蟲生真菌菌株之酵素活性，結果發現三菌株皆有不同的酵素反應，其中主要分泌相似的酵素包括β-galactosidase、phosphatase、Naphthol-AS-B1-Phosphohydrolase、β-glucosaminidase、Esterase Lipase(C8)與β-glucosidase等反應較強烈。不同培養日數下，三菌株與殺蟲相關之幾丁質分解酵素（chitinase）之含量，以第五天時分泌量最高，尤以F313於波長546nm之吸光值下，產生N-乙醯葡糖胺之值可達90.3(U/ml)，並用粉蝨成蟲誘導分泌之幾丁質分解酵素測定， F313菌株所測得幾丁質分解酵素含量較高，平均每隻成蟲可誘導0.1428 U/ml之量。三菌株初步分離經SDS膠體電泳分析，主要的總蛋白分子量分布範圍由20k Da~97k Da不等，利用非螢光染劑分析幾丁質分解酵素，測出三菌株均有類似幾丁質分解酵素之分子量約20 kDa。溫室試驗，三供試菌株皆用濃度107conidia/ml噴施20c.c/株於粉蝨成蟲，結果三次試驗在直接噴灑處理第10天時蠟蚧輪枝菌F313菌株平均防治率71.44%、白殭菌A1為72.09%，而F121菌株64.56%，顯示三菌株皆對粉蝨族群有相當程度之抑制效果，值得進一步研發與利用。 關鍵字：蟲生真菌、銀葉粉蝨、產孢量、致病性、幾丁質分解酵素、防治率 【Abstract】 The pathogenicity and efficiency of three isolates of entomopathogenic fungi were determined for selection and providing the suitable entomopathogenic fungi as an alternative method to control the silverleaf whitefly, Bemisia argentifolii Bellows Perring. Different cultural conditions and nutrients supplied in various media were tested for the physiological characteristics of Verticillium lecanii F313 and Beauveria bassiana A1 and F121. The results indicated that 12L:12D photoperiod was the best