LC-10Tvp梯度系统操作员指南-1106.pdfVIP

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赛智科技 (杭州)有限公司 LC-10Tvp 梯度操作指南 梯度洗脱 (gradient elution )又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个 分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。 原理: 流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶 剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量 因子k ,并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离 特点:提高柱效改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最 d 后一个峰的 k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。 e 梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。 r e 梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂 A 和一个强极性的溶剂 B 。 t 优点:1.缩短分析周期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,检少拖 s i 尾;4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。梯度洗脱适合分析组分复 g 杂且用不易分离的组分。 e B. 梯度系统 R n 一.对系统的认识: U 1. 系统构成:LC-10Tvp 等度系统由 LC-10Tvp 高压恒流泵,高压静 态混合器,SPD-10Tvp 紫外检测器,SCL-10Tvp 系统控制器,进 样阀,色谱柱,Clarify 工作站七个主要单元组成。 2. 各单元的功能: LC-10Tvp 高压恒流泵:为系统提供流量恒定,高压的流动相。 流量恒定是系统稳定的必要条件,高压主要是提高分离的效率, 技术服务部热线:0571 赛智科技 (杭州)有限公司 可极大的缩短实验时间。 高压静态混合器:使不同流动相均匀,快速的混合,同时尽量减少溶 解热,混合脉动和系统死体积。 SPD-10Tvp 紫外检测器:根据化合物对光的吸收规律,将光的变化 转化为电信号,进而转化为数字信号或模拟信号。 SPD-10Tvp 系统控制器:做为系统和电脑连接的中枢,提供双向的 信号传输。 进样阀:待检测样品由进样阀加载到系统中。 d 色谱柱:提供分离混合物所需的固定相。混合物流经色谱柱时,与流 e 动相,色谱柱里填充的固定相发生系列的物理作用,由于各组分在色 r e 谱柱里面的迁移速率不同,这样当它们流出色谱柱时,各组分得到分 t 离。 s i Clarify 工作站:采集检测器生成的信号,将信号转化成数据谱图, g 根据需求对信号进行不同的处理。 e 3 .系统运转的基本流程

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