传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞免疫表型分析.docx

传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞免疫表型分析 王雪梅李晋蜀李晓辉李晓静徐鸣杨炼沈伟 李惠李丹(成都市妇女儿童中 心医院检验科610091) 【中图分类号】R318.12【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2012) 27-0085-03 【摘要】目的比较流式细胞术及手工制片显微镜观察两种方法测定传单患儿异 型淋巴细胞有无差异，同时探讨传单患儿T细胞亚群的变化及异型淋巴细胞表面 抗原表达的变化。方法通过用流式细胞术及手工制片显微镜观察两种方法测定 2009-2010年间36例传染性单核细胞增多症(IM)及40例对照组患儿异型淋巴细 胞的百分比，用流式细胞仪对两组患儿T细胞亚群免疫测定、异型淋巴细胞免疫 表型测定，然后对测定结果进行比较分析。结果两种方法在测定异型淋巴百分 比上没有显著差异，传单患儿T淋巴细胞亚群与对照相比CD3.CD8增高，CD4降 低，CD4/CD8比值降低；传单患儿异型淋巴细胞与对照组相比CD28表达增加。 结论流式细胞术检测传单患儿异型淋巴细胞百分比较形态学快速、准确、易标 准化，同时还能分析异型淋巴细胞的表型。 【关键词】传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞免疫表型 传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症(IM)是由EB病毒(EBV) 感染引起的疾病，是儿童期常见、多发的疾病。EBV引起T细胞的强烈反应，形成 周围血中可见到的异型淋巴细胞,也就是活化的抑制性T细胞⑴。我们釆用流式 细胞术及传统的手工制片光学显微镜对患儿外周血异型淋巴细胞进行测定，对结 果进行比较分析，提出运用流式细胞术进行异型淋巴细胞测定的优越性及快速、 准确性，同时分析传单患儿T细胞亚群的变化及传单患儿异型淋巴细胞表面抗原 表达的改变。 1资料与方法 1.1—般资料 共76例，其中实验组选择2009年6月?2010年7月，在 我院血液科内科住院病例36例，纳入标准：年龄4岁J5岁，严格按照诊断标准 临床诊断为IM患儿；对照组40例，为门诊及部分住院患儿，门诊20例包括体 检，上感患儿，住院20例为肺炎及上感患儿，年龄4岁J5岁。 1.2实验方法 对实验组入院治疗前及出院吋分别进行静脉采取外周血， 肝素抗凝，用流式细胞术进行T细胞亚群分析，同吋在流式细胞图上测出异型淋 巴细胞百分比；同时采末梢血制造血片由有经验主管检验技师进行手工分类计数 异型淋巴细胞百分比。对对照组同样进行上述处理。 1.3统计学方法使用t检验比较传单患儿入出院吋两种方法测定异型淋 巴细胞百分比差异（组内自身比较），比较两织T细胞亚群表达的差异，检验水 准设为0.05o 2结果 1IM患儿入出院时两种测定方法测得的异型淋巴细胞百分比比较（％） 表1 由表1可以看出入出院时两种方法测得异型淋巴细胞百分比无差异。 IM患儿两种测定方法测得的异型淋巴细胞入出院时百分比比较 （%） 表2 由表2可以看出传单患儿入院与出院时候异型淋巴细胞百分比存在较 大差异。 表3传单患儿与对照组两种方法测定异型淋巴细胞百分比比较（％） 表3 由表3可以看出传单患儿与对照组相比异型淋巴细胞百分比存在较大 差异。 2.4两组T细胞亚群表达百分比比较（％） 表4 由表4可以看出传单患儿与对照组相比T细胞亚群CD3,CD8表达增高, CD4表达减低，CD4/CD8比值减低。 2.5传单患儿异型淋巴细胞与对照组CD28表达百分比比较(％) 表5 由此表可以看出传单患儿异型淋巴细胞CD28表达增高。 3讨论 传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症(IM)是由EB病毒(EBV) 感染引起的疾病?IM的病理改变是淋巴组织的良性增生，肝、脾、心肌、肾、肾上 腺、肺及中枢神经均可受累，表现为异常的淋巴细胞浸润［6］。儿童对EBV易感， 感染后可导致多种血液系统疾病，并与多种肿瘤的发生、发展有关，如儿童急性 淋巴细胞性白血病、淋巴瘤等。对于儿童身体健康危害极大。有研究认为：外周 血变异淋巴细胞多数是细胞毒性T淋巴细胞，受EBV感染性后，机体T淋巴细胞 产生抗感染的B细胞的免疫反应是各种临床症状产生的基础［3-5］o因此，观察 变异淋巴细胞的变化，对于IM疾病演变和转归都有临床意义。目前IM的诊断 主要依靠临床症状与体征的综合判断，结合实验室诊断指标确定诊断。外周血象 中出现异型淋巴细胞增高是一关键指标。而临床上异型淋巴细胞检测都是通过制 备血涂片、染色，显微镜下观察得出其百分比。不同的检验者对异型淋巴细胞的 判断不同，形态学的识别存在很大主观差异，尚未用客观定量的方法加以检测。 我们研究通过流式细胞术测定异型淋巴细胞表型及其变化规律，作为判断异型淋 巴细胞的标准，则可以弥补形态学上的不足，同吋简化实验操作，使异型淋巴细 胞的识别实现标准化操作。 流式细胞术是一项快速对单个细胞进行定量分析的新技术，利