吸光光度法是基于物质对光的选择吸收而建立起来的一类.pptVIP

* 吸光光度法：是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一类分析方法。又称分光光度法，简称光度法。包括比色法、可见及紫外分光光度法和红外吸收光谱法等。 本章主要讨论：溶液的可见分光光度法。其测定对象以金属离子为主。 第八章 可见分光光度法 §8-1概述 可见分光光度法: 是根据物质对可见光区某一波长光的吸收程度来确定含量的分析方法。 与化学分析法相比，主要有以下一些特点： (1)灵敏度高。常用于含量在1％一10-3％的微量组分的测定，甚至可测定低至10-4％一10-5％的痕量组分。 (2)仪器设备简单，操作简便、快速。 (3)准确度较高。一般吸光光度法的相对误差为2％一5％;若使用精密仪器，误差可降至1％一2％，完全能够满足微量组分的测定要求。 (4)应用广泛。该法不仅可以测定绝大多数无机离子，也能测定许多有机物；不仅用于定量分析，也可用于某些有机物的定性分析，还可用于某些物理化学常数及络合物组成的测定。 基于上述特点，吸光光度法被称作现代分析化学的“常规武器”。 §8-2光吸收的基本定律 一、物质对光的选择性吸收 1、物质对光产生选择性吸收的原因 2、物质的颜色与光吸收的关系 二、光吸收曲线（吸收光谱或吸收曲线） 由图可见，KMnO4溶液选择性地吸收了525nm附近的绿青色光，而对其互补色光400nm附近的紫色光几乎不吸收。故溶液显紫色。 吸光度最大值对应的波长称为该物质的最大吸收波长。 吸收曲线的形状和最大吸收波长的位置取决于物质的分子结构，不同的物质因其分子结构不同而具有各自特征的吸收曲线，据此也可以进行物质的定性分析。 对于同一物质，浓度不同，其吸收曲线的形状和最大吸收波长的位置不变，只是在同一波长下吸光度随着浓度的增大而增大，据此可以进行物质的定量分析。 显然，在最大吸收波长处测量吸光度的灵敏度最高，因此吸收曲线是吸光光度法选择测量波长的依据。 如果没有其它干扰，一般都是选择最大吸收波长为测量波长。 三、光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律） 1、朗伯-比尔定律的由来 1729年和1760年；布格和朗伯： 阐明了物质对光的吸收程度与吸收层厚度之间的关系。 1852年；比尔： 阐明了物质对光的吸收程度与溶液浓度之间的关系。 由比尔将二者结合起来，就得到布格-朗伯-比尔定律，一般叫做朗伯-比尔定律。 2、朗伯-比尔定律的推导（数学表达式）(略） 3、灵敏度的表示方法 (1)吸收系数a（吸光系数a ） 当液层厚度b以cm为单位、吸光物质的浓度c以g·L-1为单位时，K用a表示，称为吸收系数，其单位为L·g-1·cm-1。此时朗伯-比尔定律表示为 A=abc (2)摩尔吸光系数ε 当液层厚度b以cm为单位、吸光物质的浓度c以mol·L-1为单位时，K用ε表示，称为摩尔吸收系数，其单位为L·mol-1·cm-1。此时朗伯-比尔定律表示为 A= εbc (3)桑德尔灵敏度S 定义：当光度仪器的检测极限为A=0.001时（即仪器所能检测出的最小吸光度值），单位截面积光程内所能检出的吸光物质的最低质量，其单位为 。 S与ε的关系： S=M/ε 例题：用邻二氮菲分光光度法测铁。已知溶液中Fe2+的浓度为500 ug·L-1，比色皿厚度为2cm，在508nm处，测得吸光度A=0.190。求吸收系数a，摩尔吸收系数ε和桑德尔灵敏度S。 在实际分析中，需作标准曲线，据A=εbc应得一直线。但情况可能如右图所示。 原因较多：有来自仪器方面的；有来自溶液方面的；还有其它方面的，等等。 三、偏离朗伯-比尔定律的因素 其主要原因是测定时的实际情况不完全符合使朗伯-比尔定律成立的前提条件。 一、物理因素（主要来自仪器方面） 1、单色光不纯（非单色光）所引起的偏离 朗伯-比尔定律的重要假设条件之一是入射光为 单色光，但实际上用各种方式从光源分离出来的都是具有一定波长范围的光谱带，以它作为人射光，就有可能导致对朗伯-比尔定律的偏离。 2、非平行入射光引起的偏离 朗伯-比尔定律要求采用平行光束垂直入射。若入射光束为非平行光，就不能保证光束全部垂直通过吸收池，可能导致光束的平均光程大于吸收池厚度，实际测得的吸光度将大于理论值，从而产生正偏离。 3、介质不均匀引起的偏离（入射光被散射）