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附件1 河北省 初筛实验室HIV抗体检测标本登记表
标本
编号
姓名
性别
年龄
地 址
初筛试剂及结果
初筛日期
检验者
报告日期
备注
附件2 河北省 初筛中心实验室HIV抗体检测接收标本登记表
标本
编号
姓名
性别
年龄
地 址
送检
单位
联系人
及电话
验收人
初筛试剂及结果
初筛日期
送检日期
方法及结果
报告
日期
附件3 HIV抗体检测试验记录
编号
试剂名称:生物梅里埃
试验方法:
批号: 效期:
室温: 孵育温度:
实验日期:
标本人群: 标本数:
试验起始时间:
送检单位:
试验结束时间:
检测者: 复核者:
实验步骤:
样品、试剂、酶标板条室温平衡 分钟。
取 条板条,放在板架上,撕去板条上的封条。
在所有板孔中加入100μL的样品稀释液,包括要做质控的板孔。
在确定的板孔中加入50μL的标本或质控。设3个阴性对照和1个HIV1阳性对照、1个HIV2阳性对照。在加入标本之后加入质控,并填写加样顺序表(见下表)。
在微板上盖上贴膜,洗板前撕去贴膜,37℃孵育60分钟。
在进行孵育的过程中,准备以下试剂:
(1)洗液(1:25):浓磷酸盐缓冲液 ml,加蒸馏水 ml 。
(2)TMB底物液(1:1):TMB ml,尿过氧化物 ml。(临用前配制)
(3)1M硫酸:取 浓硫酸(98%浓硫酸相当于18M),加蒸馏水 ml。
磷酸盐缓冲液浸泡板孔60秒,洗板机洗板,洗6次。
每孔加入100μLTMB底物液,不要混匀或振荡,弃去多余的TMB底物液。
室温 ℃环境中孵育30分钟,闭光显色。
每孔加入100μL 1M硫酸,终止反应。
在450nm和620nm双波长读取每孔的吸光度,并打印结果。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A
B
C
D
E
F
G
H
结果分析:
呈阳性反应,需复检;其余均为阴性反应。
河北省性病艾滋病预防监测中心
HIV抗体检测试验记录 编号
试剂名称:金豪
试验方法:
批号: 效期:
室温: 孵育温度:
实验日期:
标本人群: 标本数:
试验起始时间:
送检单位:
试验结束时间:
检测者: 复核者:
实验步骤:
1.样品、试剂、酶标板条室温平衡30分钟。
2.将酶联反应板从密封袋中取出,取下 条板条,放在板架上。按顺序编号,设一个空白对照孔,两个阳性对照孔,两个阴性对照孔。
3.每孔加入50μl样品稀释液,取阳性对照和阴性对照分别充分混匀后各50μl加入对照孔中,空白对照孔只加样品稀释液,其余每个孔加待检血清50μl,(要先加样品,后加对照)轻轻振荡,充分混匀。并填写加样顺序表(见 表)。
4.用不干胶封片封盖反应板,置37℃温育30分钟。
5.温育期间配制洗涤液:取20×洗涤液 ml,加蒸馏水 ml。
6.撕去贴膜,用洗涤液洗5次,然后在吸水纸上拍干。
7.除空白孔外每孔加酶标抗原100μl,用不干胶片封盖反应板。37℃温育30分钟。8. 洗板5次(同步骤6),拍干。
9.每孔加显色剂A50μl ,显色剂B50μl,轻轻振荡后置37℃暗处显色10分钟,每孔加终止剂50μl。
10.选择酶标仪450nm和620 nm双波长测定,用空白孔调零点,测定各孔的吸光度。并打印结果。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A
B
C
D
E
F
G
H
结果分析:
呈阳性反应,需复检;其余均为阴性反应。
河北省性病艾滋病预防监测中心
HIV抗体检测试验记录 编号
试剂名称:上海科华
试验方法:
批号: 效期:
室温: 孵育温度:
实验日期:
标本人群: 标本数:
试验起始时间:
送检单位:
试验结束时间:
检测者: 复核者:
实验步骤:
1.将试剂盒、样本室温平衡30分钟;
2.取 条
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