应用血液分析仪后复查血片的内容和方法及程序.doc

PAGE PAGE 1 应用血液分析仪后复查血片的内容和方法及程序 的普遍使用，大大提高了临床血液学检验的质量和效率。然而，这类仪器在鉴别血细胞的形态和结构等到方面还不够完善，目前仅可作为全血细胞分析的一种过筛手段。在遇见疑问时，还必须在显微镜下复查血片，经过确认、修正或补充后才能发现报告。关于复查的标准、内容、方法和程序，现有的检验医学教科书和操作规程都没有明确的论述。为此，我们根据实践和体会，并结合国内外有关文献，对其标准、内容、方法和程序等作初步探讨。 一、复查的标准 　　在什么情况下要进行复查，迄今没有统一的标准。有人提出只要仪器给出警示信号（flag），都应进行复查，这种做法对其范围的掌握未免过宽。例如，一个外伤性急性失血的患者，仪器给出了红细胞和血红蛋白偏低的信号，就不一定要为此复查血片。又如在治疗过程中经常作血液学检验的患者，往往也不必每次都要复查。Dotson[1]在论述血片复查标准（film　revieqwcriteria）时建议，每个实验室应自行规定复查的条件，这反映了当前国外较普遍的看法。一般来说，仪器给出异常的参数、直方图或散点图；出现仪器运行提示信号(interpretiveflagmessages)等，都是复查的条件之一，但要结合仪器状态（例如白细胞三分类的仪器复查率要高于五分类者）和患者情况等作全盘考虑。 二、复查的内容 　　不少人以为复查就是作白细胞分类，其实不然。复查应包括观察红细胞、白细胞和血小板形态；估计血小板或白细胞数（印证与仪器给出的数据是否大致相符）；观察有无血小板聚集或红细胞聚集以及有无特殊形态的异常细胞和寄生虫等。 三、对复查人员的要求 　　从事血片复查的人员，必须是受过专门训练，具有血液细胞形态学基础与临床知识，并且对十分熟悉，尤其是熟悉各种直方图、散点图的正常和异常图形，并能对异常图形的意义进行解释和评估的人员。 四、复查的方法和程序 1．复查者首先要仔细阅读血液分析仪给出的各种参数、直方图、散点图和提示信号。对可能存在的血液学异常或技术性影响因素等有一个初步的印象.同时结合患者的临床情况(包括初步诊断等),确定复查的内容和重点。 2．将血液充分混匀，尽早推成血片并染色。EDTA抗凝血涂片不同于（皮肤穿剌血直接涂片，在细胞形态方面有一些不同）之处；另外，抗凝血多半在体外己储存一段时间，对细胞形态也会产生影响。 3．先用低倍或高倍镜观察。了解血片染色和细胞分布情况、有无血小板或红细胞聚集（成串、成堆），尾部有无大型、成堆异常细胞等；继续用油镜在涂片厚薄适中处浏览血片，仔细观察红细胞、白细胞及血小板的形态，并估计其数量。如果观察结果与仪器报告相符，不需进行任何补充试验，即可按仪器测定的结果发出报告。 4．如为贫血或其他血液病患者，其红细胞数量及相关的指标（如MCV、MCH、MCHC）红细胞体积分布宽度（RDW）、直方图或散点图出现异常，则着重观察红细胞的大小、形态、内涵物、着色性、大小一致性以及有无有核红细胞等。如有异常，应加以描述并报告。关于红细胞的形态学及其临床意义，内容很多，Bull等在Williams血液学第6版（2001）第22章，专门进行了讨论。他们将外周血成熟红细胞的各种形态分为12类共17种，每一种都有一个基于Basis建议的，以希腊文为词干的国际命名，同时附有扫描电镜图及其与某些疾病相关性的说明[2]。由于血液在体外储存过久或涂片时的其他技术原因，有时血片的局部区域可能出现在些假的靶形红细胞、口形红细胞和假的球形红细胞等，缺乏经验的检验者，往往会将其当作真正的异形红细胞。最简单的鉴别方法是浏览涂片的其他区域，如果是真的异形红细胞，全片（而不是个别区域）都可见到同样的异常。 5．如果血小板数目及直方图、血小板平均体积（MPV）异常，血小板分布宽度（PDW）增加，则浏览血片，首先估计血小板数Williams等认为，正常情况下，在血片厚薄适中区域（每个红细胞彼此相互接触但双不重叠），每个油镜视野，约有血小板8～15个；或每10～30个红细胞见到一个血小板。当然，这只是一个大致的估计。根据我们的经验，只要产时留心观察，并积累一定经验之后，通过浏览敌血片，大致估计血小板数并不太困难。与此同时，注意观察血小板的形态。在瑞氏染色的血片上，正常血小板为圆或卵圆形，直径1～4μm，胞质无色或淡蓝色，浆内含少许红色颗粒，有时会误认为是核。血小板在小相差悬殊，巨型血小板可达红细胞样大，胞质蓝色加深。由于在不少血小板减少性疾患、血栓性疾病、心血管疾病以及遗传性巨大血小板病等，大血小板会增多；故发现大血小板增多时应予报告[3]。在观察血小板形态的同时，还应观察有无血小板聚集现象。血小板聚集需要钙离子，因此，用除钙的EDTA抗凝涂片时，血小板分散较好，一般不会发生聚集。同时，