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荧光定量PCR检测乙型肝炎的临床研究
[摘要]目的:探讨荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)方法检测乙型肝炎的临床价值。方法:应用FQPCR技术对1562例乙型肝炎阳性血清标本和无症状健康者血清进行HBVDNA检测并对不同血清型的HBVDNA进行比较。结果:经FQPCR检测,380例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)其HBVDNA阳性率100%;246例HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)其HBVDNA阳性率88.6%;210例HBsAg(+)、HBeAg(+)其HBVDNA阳性率98.1%;190例HBsAg(+)、HBcAb(+)其HBVDNA阳性率69.5%;146例HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)其HBVDNA阳性率22.6%;66例HBsAb(+)其HBVDNA阳性率6.1%;20例HBsAb(+)、HBcAb(+)其HBVDNA阳性率60.0%;18例HBsAb(+)、HBeAb(+)其HBVDNA阳性率55.5%;286例“两对半”五项全阴性的病例中有4例HBVDNA阳性,其阳性率为1.4%。结论:血清中HBVDNA水平反映了体内HBV是否复制及复制的程度,定量PCR是鉴别HBV感染各期有价值的工具,是评价传染性的可靠方法。定量PCR测定灵敏度高,对乙型肝炎的临床诊断、治疗方案的选择和疗效观察有重要意义。
[关键词]FQPCR;HBVDNA;乙型肝炎病毒
ClinicalResearchonDetectionofHepatitisBvirusbyFluorescenceQuatitativePCR
Abstract:ObjectiveTosetupaFluorescenceQuatitativePCRassaytoexploretheclinicalvalueofdetectingtheloadofHBVDNA.MethodsFQPCRtechniquewasusedtomeasure1562samplesHBVDNAofthedifferentcasesofhepatitisBandthecasesofHBVantigenorantibodynegativeandtocomparewithits.ResultsUsingELISAascontrast,in1562clinicalserumsamplesweretested.380HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)samples,FQPCRwereallpositive,with1.21×106~7.69×109CP/mL.246HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)samples,positiverateof88.6%,with1.01×104~9.08×106CP/mL.210HBsAg(+)、HBeAg(+)samples98.1%,190HBsAg(+)、HBcAb(+)samples69.5%,286withELISAfiveindexesallnegativesamplestherewere4HBVDNApositive,1.4%.66HBsAb(+)samples6.1%.146HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)samples22.6%.20HBsAb(+)、HBcAb(+)samples60%.18HBsAb(+)、HBeAb(+)samples55.5%.ConclusionFQPCRwasanaccuratequatitativetechniqueindetectingHBVDNAanditwassignificantbetterthanELISAtechniqueindiagnosisofhepatitisBandselectionofantivirusdrugs.FQPCRcanbeusedtominitorthetruestateofHBVinfectionandamplification.ItwasimportanttoclinicaldiagnoseandselecttreatmentandminitorforHBV.
Keywords:FQPCR;HBVDNA;HepatitisBVirus
荧光定量PCR在保留PCR灵敏和特异的基础上进一步利用了分子杂交技术的特异性和光谱分析技术的灵敏性及可计量性,避免了常规PCR不能定量和污染造成假阳性的缺陷,成为常规PCR的更新换代技术,是目前最先进的PCR方法。本组采用荧光定量PCR技术对血清HBVDNA进行了临床研究,现报告如下。
1材料与方法
1.1研究对象
2002年至2004年1276例乙型肝炎阳性血清和286例全阴
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