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荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用
陈文学邹学森陈岳青黄秀珍钟礼瀑
(江西省肿瘤医院肿瘤研究所,江西南昌330029)
[摘要]荧光定量PCR技术具有简便、灵敏、准确等优点,目前已经在和性病的诊断和治疗中得到了广泛的应用,但在肿瘤方面的应用还处在研究和开发阶段。本文综述近年国内外相关荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用。
[关键词]FQ-PCR;肿瘤;人乳头瘤病毒;EB病毒
肿瘤是危害人类健康的一种疾病,它的恶性程度与预后判断主要依靠是否有转移和病理切片分期。随着分子生物学的迅猛发展,肿瘤研究领域的大量研究成果显示,肿瘤的发生、发展、治疗和预后与肿瘤细胞内部基因和肿瘤相关病毒有关。本文综述了荧光定量PCR技术的原理及其在肿瘤研究中的应用。
1.单管荧光定量PCR技术的原理
单管荧光定量PCR(fluorogenicquantitativePCR,FQPCR)的反应体系中除了普通PCR所需的引物外,还有一条荧光探针,探针的5`端标记了荧光报告基团,3`端标记了荧光淬灭基团,当这条探针保持完整时,荧光淬灭基团抑制荧光报告基团发出荧光。PCR反应开始后,随着DNA链的延伸,Taq酶的5`-3`外切酶活性将荧光探针切断,荧光淬灭基团的作用消失,荧光报告基团就发出了荧光信号,荧光信号的强弱与PCR的产物数量成正比,根据测量到的荧光信号强弱,通过分析软件得到样本的原始拷贝数。
2.FQ
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