超声波在酶催化中的应用.ppt

超声波技术在酶催化中的应用 07发酵工程 李日锋 主讲内容 超声波的定义及特性 超声波的生物学效应（作用机制） 超声波技术应用于酶催化的研究背景 超声波技术在酶催化中的应用 超声波技术在酶催化中的研究及应用前景展望 超声波的定义及特性 什么是超声波（ultrasound）： 超声波是声波大家族中的一员。声波是物体机械振动状态（或能量）的传播形式。 超声波是指振动频率大于20KHz以上的,其每秒的振动次数（频率）甚高，超出了人耳听觉的上限（20000Hz），人们将这种听不见的声波叫做超声波。 超声和可闻声本质上是一致的，它们的共同点都是一种机械振动，通常以纵波的方式在弹性介质内传播，是一种能量的传播形式，其不同点是超声频率高，波长短，在一定距离内沿直线传播具有良好的束射性和方向性 。 超声波的定义及特性 超声波的特性： （1） 超声波可在气体、液体、固体、固熔体等介质中有效传播。 （2） 超声波可传递很强的能量。 （3） 超声波会产生反射、干涉、叠加和共振现象。 （4） 超声波在液体介质中传播时，可在界面上产生强烈的冲击和空化现象。 超声波的生物学效应（作用机制） 作用机制主要包括以下三个： 机械力学作用 热力学作用 空化作用 超声波的生物学效应（作用机制） 机械力学作用： 超声波在媒质中传播，意味着超声波在其传播空间内使媒质质点进入振动状态 。 超声波在生物介质中疏密相间的传播，引起组织细胞容积变化及细胞液，反应介质的流动，产生的冲击波和微射流等能增加传质速度，提高分子间的碰撞几率，促进酶解反应，从而加快组织、细胞代谢作用。 超声波的生物学效应（作用机制） 热力学作用： 当超声波束通过机体组织介质时，介质中的摩擦力可对超声引起的分子振动发生阻抗，部分超声能被吸收并转化为热。 合适强度的超声波在机体组织内传播时，一部分能量被组织吸收由机械能转变成热能，由于不同组织细胞吸收热量不同可产生局部高温、高压，形成胞内物质的微流、涡流，促进物质的扩散与传输，有利于化学反应的进行，加速细胞新陈代谢等。 强度低、作用时间久的超声主要产生热效应。 超声波的生物学效应（作用机制） 空化作用： 这是超声波通过暴露介质中原先存在的气体核或微气泡而产生的作用效应，包括:(1)稳态空化或非崩溃性空化;(2)瞬态空化或崩溃性空化。 适宜的超声波在组织液或液体中传播时可产生乳化作用或激活气泡，使物质分子的结构形态改变，增加细胞膜、细胞壁的通透性，利于胞内、外物质的流通；或使酶的活性中心更加暴露，促进酶与底物的结合，利于酶促反应的进行。 强度高、作用时间短的超声主要产生空化效应。 超声波的生物学效应（作用机制） 此外，高强度的超声波的机械作用所产生的强大冲击波、快速溶液流，可使细胞破碎；热学作用与瞬间空化作用所产生的高温与高压，可杀灭细菌、抑制酶活性或使生物大分子分解、断裂，形成自由基等。 超声波技术应用于酶催化的研究背景 上个世纪20年代，人们首次发现了超声波可以加速化学反应。随后产生了研究在超声波作用下物质进行化学反应的一门新兴交叉学科一声化学 (Sonochemistry)。自声化学诞生以来，化学工作者们对超声场在化学各个领域中的研究工作从未间断。尤其是近年来，随着功率超声设备的普及与应用，使得声化学的研究工作蓬勃开展，国际及国内的研究论文骤然增多，学术交流非常活跃。为促进这一学科的发展，国际声化学界于1994年创办了《超声化学》(Ultrasonics Sonochemistry)杂志。 超声波技术应用于酶催化的研究背景 众所周知，对化学反应过程当有催化剂加入时，可以加速化学反应，缩短反应时间，降低反应条件。但是即便如此，有些催化反应过程所需的环境仍较为苛刻，如高温、高压、反应时间长，产率较低。众多实验结果表明，将超声波应用于催化反应过程，可进一步提高其反应速度、缩短反应时间、提高目的产物的产率、使反应在温和的条件下进行。 超声波技术应用于酶催化的研究背景 早期研究发现, 较高强度的超声波会导致酶失活。新西兰白兔脑组织匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD) 经超声波处理后活性下降, 过氧化脂质大幅度升高, 而 K- Na ATP 酶及 Ca- Mg ATP酶活性也大幅度下降。枯草杆菌蛋白酶在 50 mmol/L、pH7.8 的磷酸缓冲液中, 以波长 2～10 μm、功率 150 W 的超声波处理 2h, 酶活