紫檀影响脂多糖诱导巨噬细胞炎症因子的变化-上海海洋大学学报.PDFVIP

文章编号：１６７４５５６６（２０１９）０１００２９０８ ＤＯＩ：１０．１２０２４／ｊｓｏｕ．２０１８０４０２２６８ 紫檀 影响脂多糖诱导巨噬细胞炎症因子的变化 １ １，２ １，２ 姚　昀 ，刘克海 ，胡晓倩 （１．上海海洋大学 食品学院，上海　２０１３０６；２．上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心，上海　２０１３０６） 摘　要：采用脂多糖（ＬＰＳ）诱导小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７建立炎症模型，评价紫檀 的抗炎作用。在ＬＰＳ刺 激的ＲＡＷ２６４．７细胞中，添加紫檀 进行干预，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（ｑＰＣＲ）方法检测细胞中 炎症因子单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ１），白细胞介素６（ＩＬ６），白细胞介素 １ （ＩＬ１），肿瘤坏死因子 β β α （ＴＮＦ）和诱导型一氧化氮合酶 （ｉＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达量，Ｇｒｉｅｓｓ法检测培养基中一氧化氮（ＮＯ）的释放量， α 采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ方法进一步检测细胞中细胞外调节蛋白激酶（ＥＲＫ），ｃＪｕｎ氨基末端激酶（ＪＮＫ），ｐ３８丝 裂原活化蛋白激酶（ｐ３８ＭＡＰＫ）和核转录因子 Ｂｐ６５（ＮＦＢｐ６５）的蛋白磷酸化水平。结果发现：紫檀 能 κ κ 够显著抑制炎症因子基因的表达和炎症介质ＮＯ的释放；紫檀 ＋ＬＰＳ组中ＥＲＫ，ｐ３８和ｐ６５的蛋白磷酸化 水平显著下降。紫檀 能显著抑制炎症因子ＭＣＰ１，ＩＬ６，ＩＬ１，ＴＮＦ和ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达和ＮＯ的释 β α 放，其机制可能与阻断丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）和ＮＦＢ信号通路相关。 κ 关键词：紫檀 ；巨噬细胞；炎症因子；丝裂原活化蛋白激酶；ＮＦＢ κ 中图分类号：ＴＳ２０１．４　　　文献标志码：Ａ 　　炎症是机体应对外来刺激的一种防御机制， 对其抗炎机制进行进一步的探究，为紫檀合理 ［１］ 开发利用提供理论依据。 是一种常见的病理过程 。然而长期的炎症反 应或炎症反应过强则会诱导相关疾病的发生，如 １　材料与方法 ［２５］ 肝炎、痛风、动脉粥样硬化甚至是癌症等 。巨 噬细胞是机体先天的免疫细胞，在炎症反应中起 １．１　实验材料 ［６７］ 小鼠ＲＡＷ２６４．７细胞株购自中国科学院上 重要作用 。在 ＬＰＳ诱导的 ＲＡＷ２６４．７细胞 海细胞库；紫檀 （Ｐｔｅｒｏｓｔｉｌｂｅｎｅ，Ｐｔｅ；纯度９９％） 中，ｔｏｌｌｌｉｋｅ受体４（ＴＬＲ４）识别并结合 ＬＰＳ，进而 促进炎症信号传导并诱导ＭＡＰＫ和ＮＦＢ蛋白 购 自中国杭州瑞树生化有限公司；脂多糖 κ 激酶的激活，导致ＭＣＰ１、ＩＬ６、ＩＬ１ 和ＴＮＦ等 （Ｌ４３９１，０１１１：Ｂ４）购自美国Ｓｉｇｍａ公司；一氧化 β α 炎症因子的转录以及 ＮＯ等炎性介质的释放，最