神经和神经行为毒理学.pptVIP

* * * * * * * * 第四节、神经系统和行为毒理学研究方法与评价 1.人体的研究：临床观察或者检查（神经学检查、电生理检查、生化检查） 2.动物研究： （1）功能试验组合（functional observational FOB，US EPA 1994）：自主体征、感觉、运动、生命体征 （2）神经学检查 （3）形态学检查：病理 （4）电生理 （5）生化检查：相应的酶、靶蛋白 3. 神经元细胞的体外培养 一、神经毒理学研究方法 1.功能试验组合（FOB） 2.神经学检查 脑神经 运动功能检查 反射性检查 步态异常检查 （通常提示神经毒性作用部位） 3.形态学检查 神经元胞体 神经元核周体 轴突的近端或远端 髓鞘 星型胶质细胞 内皮细胞 肉眼和光学显微镜 观察基本病变 在解剖学水平 确定毒性作用的精确部位 同时采用细胞学、神经组织化学和电镜超微结构水平的检查有助于神经病变的诊断及作用机理的了解。 4.电生理检查 外周神经：运动神经传导速度的测定、感觉神经传导速度和动作电位测定、慢纤维传导速度的测定等 肌电图：将电极探针插入肌肉，在静息和肌肉收缩时，记录和检查肌肉的电活动。 神经毒性作用可表现为：异常的插入性活动；静息肌肉的自发性电活动；随意性肌肉收缩期间，运动单位出现干扰图形。 用电生理学检查药物所致的病理生理变化，持别是对了解药物对神经系统的起始作用有一定意义。 5.生化检查 糖代谢过程中涉及的酶系统 蛋白质合成 亚细胞结构 髓鞘成分 神经系统特殊位点的神经递质水平 通过使用促效剂和拮抗剂，观察神经递质受体的结合情况。 6.神经细胞培养 培养一天的新生大鼠海马神经元 培养7天的大鼠海马神经元 培养7天的大鼠大脑皮质神经元细胞 培养9天的大鼠海马神经元 7.迟发性神经病 动物：母鸡 每剂量组动物数量 三个不同剂量的试验组 阳性对照组500mg/kgTOCP 溶剂对照组 急性试验观察期一般为21天。 亚慢性试验连续给药13周并观察，停药后再观察一周。 观察指标：外观体征、行为活动 一般迟发性神经毒性反应在第7~10天开始出现 1.定义：神经行为毒理学（neurobehavioral toxicology） 主要是研究外源性化学物特别是低剂量 长期接触对人神经行为的毒性效应，亦及人 的心理功能的毒性效应。 特点：研究低剂量慢性神经毒性的方法 敏感 能定量 可早期检出亚临床表现 是整体试验 二、行为研究 2.研究方法： （1）动物试验：主要检测学习及记忆 操作条件反射 空间辨别试验：迷宫、避暗、跳台试 验试验等 活动度测定：开阔场地等 学习及记忆的评价方法 Y型迷宫 小鼠跳台仪 小鼠避暗仪 穿梭箱 水迷宫自动纪录仪 （2）人的观察： 心理功能测试量表，包括学习、记忆、思维、智力、注意力等。常用的是NCTB（Neurobehavioral core test battery），在1983年由WHO提出。 结果评价：指标多、变量多、混杂因素多、应选用适当的数学模型。 人的神经行为功能评价方法 不同的神经毒物可作用于不同的位点 按毒作用靶器官分类 神经细胞毒物：汞和汞化合物、锰、铝、谷氨酸、氰化物、铅、1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）。 神经髓鞘毒物：六氯酚、三甲基锡、铅、锑。 神经轴索毒物：正己烷、二硫化碳、长春新碱、丙烯酰胺、氯丙烯、除虫菊酯。 神经递质毒物：尼古丁、有机磷化合物、氨基甲酸酯类杀虫剂、可卡因、兴奋性氨基酸、苯丙胺。 * DEHP全名邻苯二甲酸酯，是一种在塑胶中常用的塑化剂，一般用来软化塑料制品，台湾将之列为第四类毒性化学物质，塑化剂DEHP的毒性比三聚氰胺毒20倍，不得添加在食品里 * Astrocytes：星形胶质细胞 Oligodendrocytes：少突胶质细胞 Microglia小胶质细胞 * 近几年国外学者在脊髓损伤的病理机制、损伤后神经元的保护、少突胶质细胞的再生及神经干细胞的移植治疗等研究方面取得了实质性地进展。 ：①脊髓损伤中以探讨其机制及新治疗方法的文章。②探讨脊髓损伤后轴突再生,生长锥作用,引导再生方向的靶点,突触再形成及功能重建的文章。③神经营养因子和内源性神经干细胞治疗的文章。 ①脊髓损伤功能恢复的基础：损伤的轴突再生及增长;轴突穿透损伤瘢痕区的能力;轴突朝着正确的靶区方向再生;轴突增长到一定程度后停止,终端形成突触,与神