过氧化氢酶固体脂质纳米粒的制备及稳定性研究-粮食、油脂及植物蛋白工程专业论文.docxVIP

独 创 性 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文 中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得江南 大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 签 名： 日 期： 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定： 江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文， 并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 签 名： 导师签名： 日 期： 3 3 结果与讨论 目 目 录 PAGE PAGE 11 PAGE PAGE 10 1 绪论 过氧化氢酶(Hydrogen peroxidase)又称触酶(Catalase,CAT)，是一类广泛存在于动物、 植物和微生物体内的末端氧化酶，是生物演化过程中建立起来的生物防御系统的关键酶 之一。该酶以过氧化氢为底物，通过催化一对电子的转移而最终将其分解为水和氧气， 从而避免生物代谢过程中所产生的过氧化氢对机体造成损害。 过氧化氢酶制剂被广泛用于食品工业、纺织工业、化妆品、医药行业等诸多行业[1]， 在医药中起到抗氧化、清除自由基等作用[2]。自由基是人体进行生命活动时所产生的一 种活性分子，在正常代谢过程中，自由基具有调节细胞间的信号传递和细胞生长、抑制 病毒和细菌的作用；但如果体内自由基过多，将导致细胞和组织器官损伤，并诱发各种 疾病、加速机体衰老。正常情况下，机体通过自我产生或者从外界摄取的方式获得超氧 化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等内源性抗氧化剂和维生素、微量元素等外源性抗 氧化剂，这些抗氧化剂对自由基的损害构成了一个天然的屏障[3]。由于某些情况[4](如高 血压病人)下，机体自我产生的内源性抗氧化剂（如过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶型、 谷胱甘肽还原酶）会不足，因此通过外在手段给这些病人加入内源性抗氧化剂十分必要。 这些内源抗氧化剂均属于蛋白类药物，自身存在诸多缺点，如稳定性差，在酸、碱 或酶的作用下容易失活；分子量较大且以多聚体形式存在，很难通过胃肠道黏膜细胞， 从而引起吸收屏障的产生；使用不方便，一般只能注射给药；在体内的半衰期短，消除 快，不能充分发挥其疗效；在体内只与特定的受体结合而起效用等。因此需对其选用合 适的方法处理以改善上述问题。例如许多学者尝试对药物进行化学修饰、制成前体药物、 应用吸收促进剂、使用酶抑制剂防止酶解、采用医学工程技术如离子电渗法增加药物透 皮吸收及设计各种给药系统等解决这些问题。其中各种给药系统备受关注。 传统的载体形式有脂质体、乳状液、聚合物微米粒以及纳米粒。其中脂质体的研究 [5]较为广泛，脂质体在体内具有良好的靶向性和生物相容性，但由于在一般情况下脂质 体具有在体内外不稳定、被包载药物易于渗漏等缺点；乳状液由于其不稳定限制了其进 一步应用；聚合物则由于其含有细胞毒性且存在在体内降解性差等问题，为此研究者们 致力于研究开发新型的载体形式[6]。其中，固体脂质纳米粒给药系统具有独特的药物保 护作用及控制释放特性而日益受到关注[7]。 1.1 固体脂质纳米粒概述 固体脂质纳米粒[8,9](solid lipid nanopartieles，SLN)是以固态的脂质（天然或合成的 如卵磷脂、甘油三酯等）为载体，将药物包载其类脂核中，经不同的制备方法制成的粒 径在 50-1000nm 之间的固态胶粒给药体系。与传统的药物载体形式相比，药物由于包封 于生理相容性较好的脂质骨架中从而实现了更好的控制释放速率。SLN 的突出优点在于 物理稳定性高、其颗粒粒径在纳米数量级，可用于口服及注射给药；生理相容性好且在 体内可降解，制备过程中无毒性物质残留；制备过程简单、能控制内部药物泄漏、且通 过对其进行表面特征修饰，可实现其靶向给药等优点。在上世纪九十年代已有研究者对 进行研究，经过研究者们的努力，且其本身具有工业大规模生产的潜力，经过十年的发 展，SLN 的应用得到了显著的成果[10]。 传统的 SLN 的原料主要为固态脂质和乳化剂。固体基质为生理相容性好且在体内 可降解的固态脂质如甘油三酯、部分甘油脂如单硬脂酸甘油酯，脂肪酸，如十八碳酸、 十六碳酸、二十二酸等 [7,11]。乳化剂有各种磷脂类如卵磷脂、脑磷脂、poloxamer 系列 等，乳化剂可用来稳定 SLN 粒子，由于 SLN 进入体内后能被吞噬细胞和网状内皮系