含马兜铃酸中药关木通的安全评价研究-中药学专业论文.docxVIP

生国主医丛窭魅主麴皿究压2QQ!缓殛±班筮生堂焦遮窑——————————————主塞煎蔓中文摘要 生国主医丛窭魅主麴皿究压2QQ!缓殛±班筮生堂焦遮窑——————————————主塞煎蔓 中文摘要 近些年，含马兜铃酸(Ari sto[ochic acids，从)中药的毒副反应闻题在社 会上反应强烈，其中关木通和含关木通的中成药问题尤为突出。很多研究已证 实，这些中药的毒性反应是由其含有的成分马兜铃酸(从)所引起，主要表现 为肾毒性和致肿瘤性。很多国家，包括美国、西班牙、舆地剩、埃及、马来西 亚、菲律宾、日本等已采取措施，限制含马兜铃酸中药的进口和使用。我国国 家食品及药品监督管理局也取消了关东通的药用标准。由于在我国临床使用的 含马兜铃酸中药品种较多，因此搞清楚关木通的毒性与马兜铃酸量的关系，对 于指导其它含马兜铃酸中药的应用具有指导意义。 虽然对于关木通的毒性研究已有一些报道，但到目前为止所报道的关木通 毒性研究中，没有进行供试品的马兜铃酸定量。而关木通药材中由于产地、呆 收季节、加工、贮存等因素不同其含有的马兜铃酸量有很大的变异，因此仅仅 以关木通生药量为剂量来研究毒性不能真正反映关木通的毒性程度与剂量的关 系，也不能确定到底关木通使用多长时间会引起毒性：即关木通致毒的阈剂量 及』临界致毒时间不清楚。本课题是以关木通中含有的马兜铃酸作为剂量依据， 在研究中同时采用了含有相当量的马兜铃酸的关木通提取物和精制马兜铃总 酸，两者对比进行研究，从而进一步确定了关木通的急性毒性、慢性毒性以及 致肿瘤性均与马兜铃酸密切相关，同时还分别研究了关本通致急性肾脏毒性、 慢性肾脏毒性以及致肿瘤性过程中马兜铃酸摄入的量一毒、时一毒关系，以希 望找出临床应用中的安全剂量和安全用药时间。本研究得到国家中医药管理局 重大课题项目基金资助(课题号：国中医药科2 001ZDZX04)。 一．马兜铃科关木通及木通科三叶木通、五叶木通对小鼠的急性毒性研究 通过比较研究若木通和关木通马兜铃总酸对小鼠的急性毒性试验，发现给小 鼠单次灌胃关木通提取物或精制的关木通-5兜铃总酸二者所致的毒性特征一 致，死亡时程相似，以马兜铃酸计，两者对小鼠的LD。。值相近，说明关木通提取 物单次给药的致死作用与相当剂量的马兜铃总酸的致死作用相近，表明关木通 急性毒性主要是由马兜铃酸引起，动物死亡率与马兜铃酸呈明显的剂量反应关 系。关木通提取物单次给药后，未出现动物死亡的剂量为26．29生药／kg(折合 成AA量约为26mg／kg)，相当于人用裁量的262倍t按体表面积折算29倍)，导致 半数动物死亡的剂量为5 3．79生N／kg(折合成从量约为53mg／kg)，相当于人用 主国生医型豇瞳史药盟红丘2鱼Q!题亟_：盟盔生堂焦迨室一——————————————』也堑缝埋剂量的5 主国生医型豇瞳史药盟红丘2鱼Q!题亟_：盟盔生堂焦迨室一——————————————』也堑缝埋 剂量的5 37倍(按体表面积折算59倍)。 由于已经取消了关木通的药用标准，将以木通科木通代替关木通，鼓对木通 科三叶木通和五叶木通的急性毒性进行了观察。结果显示，按照可配制的最大 浓度及最大体积给小鼠灌胃，一日给药2次，三叶木通和五叶木通均未引起动物 异常表现和死亡。两种木通对小鼠的最大耐受量倍数已远高出人口服用量的 2000倍，所以认为三叶木通和五叶木通的毒性远较关木通低，可以考虑在药效 不降低的情况下使用这两种木通科木通代替关木通。 二．关木通及关木通马兜铃总酸的急性肾毒性研究 给小鼠单次灌胃不同剂量的关木通，同时以精制的关木通马兜铃总酸作对 照，观察对小鼠的肾损害作用。分别检查了血尿素氮、肌酐和谷丙转氨酶、谷 草转氨酶，观察肾脏和肝脏组织形态学的改变。结果显示，给予关木通和马兜 铃酸后，在所试所有剂量水平下，动物的血尿素氮(BUN)和肌酐(cr)水平呈 剂量依赖性增高，随剂量增高尿素氮和肌酐升高显著；除关木通最小剂量组外， 血清谷草转氨酶在其他剂量组及马兜铃酸组均出现显著增高，并呈剂量依赖性。 组织形态学上显示肾脏出现明显病变，并且肾脏损害随剂量加大逐渐加重；肝 脏只在高剂量组存在病理改变。 三．关木通及关木通马兜铃酸的慢性肾损害研究 采用2000版《药典》中推荐的人日用药剂量等倍(按体表面积折算后与《药 典》中推荐的人日用药剂量相等)、5倍、10倍、20倍的关木通提取物，同时 用与关木通20倍剂量组马兜铃总酸含量相当的精制关木通马兜铃总酸作为对 照，给大鼠灌胃，膈周给药7天，给药试验期为26周，并停药观察4周。检查 尿量、尿比重及尿中N一乙酰一D-D一氨基葡萄糖苷酶(NAG)、D：一微球蛋白(D： 一MG)、蛋白、葡萄糖和电解质含量，采用免疫组织化学法观察肾脏TGF B，蛋 白表达和肾小球基底膜抗原与抗