专题二--细胞工程.ppt

（8）动物细胞培养与植物组织培养的比较 培养目的 动物细胞培养特点 结果 培养基 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 细胞的全能性 细胞的增殖 固体；营养物质、激素 液体；营养物质、血清 培养成植株 培养成细胞系或细胞株 快速繁殖培育无毒植株 获得细胞产物或细胞 （1）液体培养基； （2）成分中有动物血清。 二、动物细胞融合 ——可用于制备单克隆抗体 1、概念： 2、结果: 两个或两个以上的动物细胞结合形成一个细胞 的过程 形成具有原来两个细胞的遗传信息的单核 杂种细胞 3、理论基础： 细胞的全能性 4、原理： 细胞膜的流动性、细胞增殖 5、促融方法 （1）物化法 （2）生物法 :电刺激、离心、PEG（聚乙二醇） :灭活的仙台病毒 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性 保留融合活性 :不能感染细胞 :能诱导细胞融合 6、过程 不同个体的两个或多个细胞 灭活病毒 或PEG或电刺激 杂交细胞 : 包括膜融合、质融合和核融合 7、意义 （1）克服了远缘杂交不亲和的障碍； （2）成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新 品种的重要手段。 三、单克隆抗体 1、概念： 由单个效应B细胞进行无性繁殖形成的细胞系 所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。 2、普通抗体： （1）产生细胞 （2）成分 （3）特点 : 效应B细胞 : 蛋白质或免疫球蛋白 :血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差 3、单克隆抗体特点： 化学性质单一，特异性强，灵敏度高 4、单克隆抗体的制备： 动画 先用多孔培 养板上培养，每孔只留一个杂交瘤细胞的情况下开 始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群 （1）过程 给小鼠注射 特定的抗原 脾脏中分离 效应B细胞 培养骨髓瘤 细胞 骨髓瘤细胞A 灭活 病毒 A、B两种 未融合细胞 A—B融合 B—B融合 A—A融合 选择 培养基 杂交瘤细胞 克隆 检测 小鼠体 内外培养 单克隆抗体 （2）两次筛选的原因 ? 第一次筛选可得到多个杂交瘤细胞； ? 第二次筛选才能得到单一杂交瘤细胞。 （3）杂交瘤细胞的特点 既能迅速大量繁殖，又能产生单专一抗体。 （选择性培养基） 连接 （4）单克隆抗体的应用： ① 诊断疾病： ② 药物导向治疗： ③ 分离、纯化抗原分子： 运用药物与单克隆抗体连接在一起 制成“生物导弹” 诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原 制备的单克隆抗定位诊断 诊断试剂具准确、高效、简易、快速的优点。 * * ⊙ ⊙ ⊙ 第一节 细胞的生物膜系统 第二节 植物细胞工程 第三节 动物细胞工程 思考讨论 ：下图是变形虫去核实验示意图，这个实验 说明了什么？ 变形虫 切 无核细胞质 单独培养 死亡 去核细胞 单独培养 死亡 植入细胞核 正常生活 细胞只有保持完整性，才能正常地完成各项生命活动。 思考讨论 ? 细胞的结构是怎样的？具有单层膜的细胞结构有 哪些？双层膜的有哪些？无膜结构的有哪些？ ? 生物膜的结构怎样的？其化学成分又是由什么组成？ ? 从上表中，你能得出什么结论？ 膜结构的化学成分基本相同。 ? 不同生物的同一种膜的成分一样吗？ 各种真核细胞膜内蛋白质与脂质的比值 1.3 变形虫 1.1 人红细胞 0.85 小鼠肝细胞 0.23 神经髓鞘 蛋白质/脂质（重量比） 细胞膜的种类 ? 从右表中，你能得出什 么结论？ 不同种类的生物膜的蛋白 质和脂质的比例存在较大差异。 一般地说，功能越多，膜蛋白 比例越大，种类越多；反之， 所含蛋白质的种类和数量越少。 一、生物膜系统的概念： 细胞内由细胞膜、核膜、内质网膜、高尔基体膜、线粒 体膜、质体膜等膜结构组成的统一整体，由这些化学组成相 似，基本结构大致相同的膜形成的结构体系——生物膜系统。 细胞中由各种膜构成了生物体的生物膜系统。 二、各种生物膜在结构上的联系 内质网 核膜 线粒体 细胞膜 直接联系 高尔基体 间接联系 间接联系 膜结构联系1 膜结构联系2 内质网膜 细胞膜 高尔基体膜 直接转化 间接转化 间接转化 三、各种生物膜在功能上的联系 ? 蚕的丝腺细胞在5龄的初期主要是细胞本身增大， 这时细胞质中的核糖体多为游离型的，而内质网数量 很少。但到5龄的后半期，腺细胞开始大量合成和分泌 丝心蛋白，且大量核糖体与内质网结合，形成发达的 粗面型内质网。 通过上述事实，你