再生植株鉴定芦荟的植物组织培养过程.PPT

植物组织培养和脱毒技术正是实现这一重要前题的快繁技术。它已被广泛用于各种优良品种的迅速繁殖和推广，在花卉、园艺、农林等方面发挥重要作用。 由植物的一个器官、组织甚至细胞，通过离体培养，获得一个完整的植株。 打破有性生殖的限制，极大提高植物的繁殖效率。 快速繁殖新品种，迅速推广 周期短（1-3月） 不受季节限制 繁殖系数高 有效保持优良品种的特性 离体无性繁殖 性状不分离，也不退化 避免病虫害侵染 是异交作物和无性繁殖品种繁育的理想途径 生产无病毒种苗，防治品种退化 节约耕地，提高农产品附加值 以变态器官作为繁殖体的作物年产品用留作种的比例 大蒜 1/8-1/5 马铃薯 1/10 贝母1/3 魔芋1/5 便于运输 种苗体积小，自带容器，便于携带和运输。 以马铃薯为例，一亩地4000株计算，常规薯4000个重200kg（50g/个）,试管薯只有1kg（100-200mg/个） 离体快繁的一般技术 培养材料选择及消毒 材料的初代培养(无菌母株制备) 试管苗的增殖与继代培养（不定芽增殖） 试管苗的生根与移栽（完整植株形成） 再生植株鉴定 1、培养材料选择及消毒 种和品种选择 增殖方式 腋芽增殖 不定芽增殖 体细胞胚增殖 愈伤组织增殖 腋芽增殖 培养方法简单，能高度保持遗传稳定性，能长期继代增殖。 一般不需要添加外源激素，即使加也要严格控制浓度，防治产生愈伤组织。 不定芽增殖 从现存的芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形成芽。 繁殖系数高 遗传稳定性较好 继代次数有限 体胚增殖 增长率高，双极性免去生根环节 但胚状体休眠的诱导和接触难以把握，成苗率不高。 除特殊用途（人工种子），还不用于快繁 愈伤组织增殖 所有植物通过组培方法均可诱导愈伤组织，再进一步分化形成植株。 一切通过其它方式不能成功的植物，均可通过此途径获得组培苗。 成功率高，繁殖系数大，但遗传稳定性差。 对品种遗传稳定性要求高的作物一般不采用这一途径。 2）、培养材料的灭菌 A、常用消毒剂 对消毒剂的要求是： B、培养材料灭菌 不同材料其带菌情况不一，选择不同的消毒剂进行处理。通常先用自来水冲洗，有的需用肥皂、洗衣粉或吐温等进行洗涤之后在消毒，消毒完后用无菌水多次冲洗后方可接种。值得注意的是，常规灭菌针对培养材料的外生污染菌，对内生菌无效。内生菌污染问题很难界定并且很难解决。 2、材料的初代培养 1）、初代培养物的建立 做到：保证无菌、条件合适、技术过关和防止污染和外植体的褐变 保证无菌是最基本的前提。 选择合适的种类、品种及培养部位； 选择合适的培养基、激素及其它添加物 还要注意掌握适宜的培养条件。 2）、培养反应的观察与统计 植物离体快繁时，由于植物种类不同，所采用的外植体类型不同及培养基的化学组成不同，因而器官再生途径有很大的差异。 外植体接种后，可能通过不同的途径实现全能性的实现。有的先形成愈伤组织再进行器官分化；有的直接形成胚状体；有的先芽后根；有的先根后芽。 愈伤组织发生 愈伤组织（Callus） 组织培养中外植体经脱分化形成的一种无组织结构的团块组织，由于这种组织以往常见于受创伤的植物器官和基干表面，故叫愈伤组织（Wound Callus）。 离体培养时，一方面由于材料受切伤后分泌的伤源激素作用，另一方面培养基中添加的外源激素的作用，往往在切口处产生愈伤组织。生长素,尤其是2，4——D对愈伤组织诱导形成中作用显著。 芽形成 芽的产生方式有两种： 从愈伤组织上产生不定芽（除现有的芽之外，在任何器官上的通过器官发生重新形成的芽 ）； 从茎尖、侧枝上产生，即腋芽萌发形成丛生芽。（由于培养基中添加高细胞分裂素的作用，促进了腋芽的萌发 ）. 根形成 根的起源有两种： 一种是起源于苗基部切口处形成的愈伤组织上，由愈伤组织内部形成； 另一种是起源于苗基部切口处愈伤组织的上部，直接起源于中柱鞘细胞，由于发生与茎的中柱相连，故利于移栽成活。 胚状体形成 概念： 离体培养下起源于非合子细胞，经历了胚胎发生和胚胎发育过程所形成的类胚结构。 原球茎形成 3、试管苗的增殖与继代培养 1）、试管繁殖速率及计算 理论计算： 接种一个芽或一块增殖的培养物，经一段时间的培养后看能得到多少个芽或苗，从而推算理论上一年能繁殖出多少苗。 实际计算： 接种一个芽或转接一个苗，经过一定的实际繁殖周期看实际得到多少个苗或成苗，再换算成每个周期实际繁殖的数量。 Y＝m×Xn＝mXn Y——年繁殖数 m——无菌母株苗数 X——每个培养周期增殖的倍数 n——全年增殖次数 月季繁殖速率计算 每5周转接一次（N=10） 甲品种每次增殖3倍，乙品种每次增殖5倍，丙品种7倍。X=3，5，7