光动力治疗恶性肿瘤光照时间的研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

博士学位论文光动力治疗恶性肿瘤光照时间的研究 博士学位论文 光动力治疗恶性肿瘤光照时间的研究 博士研究生：李黎波 指导教师：罗荣城 摘要 光动力疗法(Photodynamic Therapy，PDT)是利用激光的光化学原理，利用 特定波长的激光激活肿瘤组织内滞留的光敏剂，与肿瘤组织内的氧发生作用， 产生化学性质很活泼的单态氧及一些活泼的自由基，这些产物与生物大分子发 生作用，破坏细胞和细胞器的结构与功能，从而杀伤肿瘤细胞，达到治疗肿瘤 的目的。80年代国际国内兴起PDT热，但是由于当时光敏剂制作工艺不成熟， PDT激光器体积大、输出功率不稳定，因此PDT没有得到进一步的发展和广泛 的临床应用。近年来，随着科学技术的高速发展。半导体激光器和新型光敏剂 Photofrin的开发，光动力治疗恶性肿瘤日益受到重视。光动力疗法与手术、化疗、 放疗等常规治疗手段相比具有：①创伤小；②毒性小；③选择性好；④适用性 好；⑤重复性好；⑥可姑息治疗；⑦可消灭隐性癌病灶；⑧可保护容貌及重要 器官功能等优点，己逐步成为肿瘤常规治疗手段之一。现在美国、日本、加拿 大、和英国等国家已经将光动力治疗广泛应用于临床，实践证明，光动力治疗 对于早期癌症和癌前病变能达到根治的效果，对于中晚期肿瘤也有很好的姑息 作用。其缺点为皮肤光过敏以及PDT治疗深度较浅对人体深部肿瘤难以奏效。 我们在临床光动力治疗工作中发现，常规情况下内镜下PDT治疗恶性肿瘤 在患者体内输注光敏剂后48h进行首次激光光照治疗，为了达到彻底治疗残余 肿瘤和深部肿瘤的目的，在输注光敏剂后96～120h清除肿瘤坏死组织，并对深 层肿瘤组织进行复照，由于间隔时间较长(2～3天)，加上光动力治疗后患者有 局部疼痛不适的感觉，因此很多患者心理负担很重，有时严重影响病人康复。 因此我们考虑能否将注入光敏剂后的光照时间缩短，首先是激光复照的时间， 中文摘要 中文摘要 如果可行的话也可考虑缩短首次激光照射的时间，从而达到在不影响光动力治 疗疗效的前提下，缩短临床上恶性肿瘤患者住院治疗时间，减轻患者的心理和 经济负担的目的，并进一步研究通过缩短首次光照时间提高临床PDT疗效的问 题。因此我们设计本项荷瘤小鼠光动力治疗的动物实验研究，针对荷瘤小鼠注 射光敏剂后激光光照时间进行研究，我们也做了部分临床试验以探索临床恶性 肿瘤光动力治疗中缩短注射光敏剂后激光复照的间隔时间对光动力疗效等方面 的影响，为临床进一步提高光动力治疗的疗效和减少光动力治疗的并发症打下 基础。 第一部分光动力治疗恶性肿瘤光照时间的动物实验研究 研究方法我们选用4周龄昆明种小鼠为实验对象，臀部皮下接种小鼠S180 细胞，5．7天后种植瘤生长至7-9mm为合格荷瘤小鼠模型。光敏剂为Photofrin， 激光器为DIOMED630型半导体激光器。实验组为PDT组，给以Photofrin光敏 剂并激光照射，根据注射光敏剂后光动力激光照射时间的不同来分组，分别为 尾静脉注射光敏剂后lmin(T1)、5 mill(T2)、15 min(T3)、30 min(T4)、60 min(T5)、6h(T6)、12h(T7)、24h(T8)、48h(T9)麸九大组，每组合格荷 瘤小鼠15只。我们在光照后即刻、光照后48h各处死1只小鼠获取肿瘤标本， 其余每组保证有12只小鼠作长期疗效观察。光照后40天处死所有小鼠获取肿 瘤标本。对照组为单纯肿瘤组，不给以光敏剂和光照PDT治疗。光敏剂Photofrin 浓度为lmg／ml，按10mg／kg尾静脉注／k4,鼠体内。微透镜光纤照射肿瘤，照射 能量密度为120J／cm2，光照后每天观察肿瘤及皮肤变化情况并计算小鼠生存率。 各组处死荷瘤小鼠后，剥开皮肤，暴露肿瘤，观察肿瘤外观形态、质地、切面、 大小，并尽快留取常规病理检查和电镜观察标本行相应检查。 研究内容从光照治疗后小鼠光照部位外观形态观察看，治疗组各组在光照 后即刻处死的肿瘤外观形态情况基本相似，只是从Tl到T9组光照部位的皮肤 充血肿胀程度逐渐减轻；照光后48h处死各组的情况与照光后即刻处死组不同 之处在于照光部位肿瘤表面趋平且皮肤色泽变深为黑褐色，皮肤失去弹性，变 硬，与正常未照光皮肤边界清楚，切开皮肤可见渗出多，以T1一T5为重，T6。T9 II 博士学位论文 博士学位论文 为轻。考虑其原因可能是注射光敏剂后短时间内，血浆内光敏剂浓度很高，而 扩散到血管外基质和组织中的光敏剂尚很少，因此对微血管内皮细胞损伤重， 血管通透性破坏重，皮下疏松结缔组织的渗出严重，水肿严重。但这样的水肿 经过一定时间后是比较容易吸收、消退的，所以长时间随访，可见皮肤外貌保 持良好。光照后40d处死组可见T6～T9组部分治愈小鼠修复的皮肤有瘢痕形成， 且毛发生长也较困难，而Tl—T5组