肝脏缺血／再灌注损伤中的作用-中华危重病急救医学.PDF

·233· 主堡鱼重疸复塾匿堂呈Q!!生!旦箜!!鲞筮!塑垦堕里堡也堡!翌堕鲤：丛塑!垫!!!!!!：兰生塑!：i ·论著· 自噬在血红素氧合酶1抑制大鼠 肝脏缺血／再灌注损伤中的作用 蓝升李金泰刘毅 200433上海，第二军医大学附属长海医院麻醉科 通讯作者：刘毅，Email：ziboliuyi@yeah．net DOI：10．3760／cma．j．issn．2095--4352．2017．03．008 【摘要】目的探讨自噬在血红素氧合酶l(HO—1)减轻肝缺血，再灌注(I承)损伤中的作用。方法按 h，再灌注6h制备肝部 随机数字表法将40只健康雄性sD大鼠分为5组，每组8只。以肝左叶和中叶缺血1 h腹腔注射HO一1 分Im损伤模型；假手术(Sham)组只开腹，不进行肝脏I，R。钴原卟啉(CoPP)组于l瓜前24 5 诱导剂CoPPmykg，而锌原卟啉(ZnPP)组和6一氨基一3一甲基嘌呤(3-MA)组分别在CoPP预处理后、豫前 1 25 30 h取下腔静脉血和肝组织， h腹腔注射HO一1抑制剂ZnPP m毋g。于再灌注6 mg／kg或自噬抑制剂3-MA 采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平；苏木素一伊红(HE)染色后光镜下观察肝组织病 理学改变并进行病理评分；原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肝细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI)；电镜 下观察肝组织自噬体形成情况；反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测肝组织HO一1、天冬氨酸特异性半胱氨 组织损伤严重，肝组织病理评分显著升高(分：12．0+2．0比1．3±o．9，P0，01)，TUNEL检测显示凋亡细胞明显 4．62±0．40比1．05±0．15，均P0．01]，而HO一1表达和自噬表达差异均无统计学意义。与I／R组比较，CoPP 达及肝细胞自噬增加[HO一1 比113±26，自噬体计数(个)：8．75±0．87比1．25±0．71，Beclin一1mRNA(2““1)：2．85±0．28比1．15±0．11， Atg一5 达及减轻肝损伤的作用；而给予3-MA则不影响CoPP预处理后HO一1的表达及活性增加，但可抑制自噬表达， 同时也消除了CoPP预处理的保护作用。结论HO一1可调控肝I／R时自噬的表达，而自噬可能介导了HO—l 减轻肝脏I／R损伤的作用。 【关键词】缺血，再灌注，肝；血红素氧合酶1； 自噬；预处理 基金项目：国家自然科学基金；上海市自然科学基金(12ZRl438600) ontheroleof inheme 1 inrats Study autophagyoxygenasepreventinghepaticischemia／reperfusioninjury Lan Yi Jintai，Liu Sheng,Li Medical 200433,China DepartmentofAnesthes舶gy,ChanghaiHospital,SecondMilitary University,Shanghai author：Liu CorrespondingYi，Email：ziboliuyi@yeah．net To theroleof inthe mechanismofheine 1 [Abstract]Objective