土壤中中性糖和氨基糖的提取方法探索-生态环境学报.DOC

PAGE 1070 生态环境 第15卷第5期（2006年9月） 张威等：不同水解方法对土壤中性糖和氨基糖含量测定的影响 PAGE 1071 生态环境 2006, 15(5): 1067-1071 Ecology and Environment E-mail: editor@ 基金项目：中国科学院知识创新工程重要方向项目（KZCX3-SW-433）；国家自然科学基金重点项目 作者简介：张 威（1980－），女，博士研究生，主要从事土壤中碳、氮转化与循环研究。E-mail: zhangwei0531@ *通讯联系人 收稿日期：200 不同水解方法对土壤中性糖和氨基糖含量测定的影响 张 威1, 2，何红波1，解宏图1，白 震1, 2，张旭东1, 3 *，张 明4 1. 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室，辽宁 沈阳 110016；2. 中国科学院研究生院，北京 100039； 3. 辽宁沈阳农田生态系统国家野外观测研究站，辽宁 沈阳 110016；4. 辽宁大学生命科学系，辽宁 沈阳 110036 摘要：碳水化合物是土壤有机质的重要组成成分，其含量和特性对土壤性质有很大的影响。水解试剂的选择对土壤碳水化合物测定的准确度有着至关重要的影响，文章首次研究了不同水解方法测定土壤中性糖和氨基糖含量的差异。结果表明，中性糖的最佳水解条件为4 mol·L-1 三氟乙酸(TFA)在105 ℃下水解4 h，氨基糖的最佳水解条件为6 mol·L-1 HCl在105 ℃下水解8 h。此外文章实现了8种中性糖(核糖、鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖)和4种氨基糖(氨基葡萄糖、氨基半乳糖、氨基甘露糖和胞壁酸) 关键词：中性糖；氨基糖；水解；土壤；气相色谱 中图分类号：S132 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2006）05-1067-05 碳水化合物约占土壤有机质总量的10%～20%，是土壤中易降解的有机成分之一[1-2]。碳水化合物的含量和特性不仅影响土壤微生物活性，而且与土壤结构形成密切相关，因而对土壤环境质量和土壤中物质转化与循环有着重要的影响。目前，碳水化合物的含量和特性已成为土壤有机质研究中一项重要指标和主要对象[3]。 根据碳链上取代基团不同，碳水化合物可分为中性糖、氨基糖和糖醛酸。其中中性糖大多数以多糖形式存在(主要为纤维素、半纤维素、淀粉等)[4]，是形成土壤团粒结构的重要胶结物质，同时也是微生物活动的碳源和能源[5-7]。土壤中以氨基葡萄糖和胞壁酸为代表的氨基糖聚合物是土壤微生物细胞壁残留物，其变化可反映微生物对土壤有机质循环与转化的相对贡献[8-10]。糖醛酸在土壤中含量很低，其在土壤中作用研究也较少。分析土壤中碳水化合物种类和数量时，需将其水解为单糖后进行测定，而水解试剂的选择对测定的准确度有着至关重要的影响，目前尚无这方面的相关讨论。本文将探索土壤中性糖(8种)和氨基糖(4种)的最佳水解条件并对中性糖和氨基糖的色谱同时分离进行了研究。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 Agilent HP 6890气相色谱仪，配火焰离子化检测器(FID)，DM-1型石英毛细管气相色谱柱(30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)，N-N型旋转蒸发仪，FD-1型冷冻干燥仪，Reacti-ThermⅢ型精密加热器，TDL-5-A或TGL-16G离心机，DHG-9123A型烘箱， 8种中性糖标准，如核糖(RIB)、鼠李糖(RHA)、阿拉伯糖(ARA)、木糖(XYL)、葡萄糖(GLU)、半乳糖(GAL)、甘露糖(MAN)和岩藻糖(FUC)，4种氨基糖标准如氨基葡萄糖(GLU-N)、氨基半乳糖(GAL-N)、氨基甘露糖(MAN-N)和胞壁酸(MUR)，内标(戊五醇)都从Sigma-Aldrich公司和Fluka公司购买；盐酸羟胺从Sigma-Aldrich公司购买，4-二甲氨基吡啶从Fluka公司购买；二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷和无水甲醇从Dima公司购买；吡啶、三氟乙酸(TFA)、盐酸和乙酸酐均为分析纯。 1.2 方法原理 中性糖和氨基糖在吡啶-甲醇溶