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基因工程复习课(第二课时) 复习内容:1.3 基因工程的应用、 1.4蛋白质工程 1. 利用蛋白质工程改造天然蛋白质,进而改变其功能,获得毒副作用很小、专一性增强、药效加强、稳定性增强的理想的药物如胰岛素是治疗依赖型糖尿病的特效药物,但是天然胰岛素在人体内寿命只有几小时,重症病人每天得注射好几次药物,给病人带来不便和痛苦。通过蛋白质工程改变胰岛素的空间结构,以延长半衰期,得到长效胰岛素。还可以在不改变胰岛素活性部位结构的前提下,增强其他部位结合强度,使之难以被酶所破坏,从而增强其稳定性。 (1)蛋白质工程的基本途径是 : (2)与基因工程相比,合成的蛋白质有何特点? (3)用蛋白质工程生产的胰岛素,与天然胰岛素比较,显著的优点是? 答案 (1)从预期的蛋白质功能出发→设计预期的胰岛素分子结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的核苷酸序列(基因) * 学习目标 通过复习能够举例说出基因工程应用方面的成果,能够识记基因诊断与基因治疗的原理和应用 通过复习能够记住蛋白质工程的目的、原理和操作程序,并对基因工程和蛋白质工程 作分析比较 尝试总结: 两者的组成成分及结构基本相同 目的基因通过转录和翻译表达遗传信息 生物共用一套遗传密码 基因重组 一、基因工程相关原理 基因工程的应用 基础梳理 1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的__________。 2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产__________。 3.基因治疗:_______________导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。 把正常的外源基因 品质 药物 归纳整合 一、基因诊断与基因治疗 1.基因诊断 (1)原理:DNA分子杂交。 (2)过程:制备用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA(患者DNA)分子作探针;将待测DNA制成单链;让两者进行杂交,若两者能进行互补配对,则说明患有此病,否则不患此病。 2.基因治疗 (1)原理:把正常的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的。病人细胞中既有缺陷基因,也有正常基因。 (2)方法:体外基因治疗和体内基因治疗。 (3)体外基因治疗:先从病人体内获得某种相关细胞,进行培养,然后在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内,这种方法叫做体外基因治疗。 (4)体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫做体内基因治疗。 举例:基因治疗的过程(以镰刀型细胞贫血症的治疗为例) 举例:基因治疗的过程(以镰刀型细胞贫血症的治疗为例) 用同一种限制性核酸内切酶在运载体DNA上切开一个切口,用DNA连接酶将正常血红蛋白基因连接在运载体DNA上,形成重组运载体 形成重组运载体 将携带正常血红蛋白基因的重组运载体导入患者的造血干细胞中,并将重组运载体插入到染色体。用选择培养基筛选出含重组质粒的造血干细胞 重组运载体的转化与筛选 步骤 过程 获取正常的血红蛋白基因 用限制性核酸内切酶从人的DNA分子中切取血红蛋白基因 步骤 过程 将含正常血红蛋白基因的造血干细胞回输给患者骨髓 将携带正常血红蛋白基因的造血干细胞输入患者骨髓中,此造血干细胞产生含正常血红蛋白的红细胞,以根治镰刀型细胞贫血症 结果:健康的基因表达掩盖了缺陷基因的表达。 说明 :对于遗传病的治疗,最根本的方法是进行基因替换或修复。基因治疗的最佳时期理论上是受精卵时期,这样可以使个体的每个细胞都含有正常基因,但在现实生活中是不可能的,因为不可能人人都在受精卵时期进行基因检查。其次是对患者进行相关细胞的基因替换,如对于遗传性糖尿病患者,只对胰岛B细胞进行基因替换,该个体就能正常分泌胰岛素,糖尿病得以治疗。但这种局部细胞的基因替换,并没有改变其他部位细胞的基因,如精原细胞等,因此,患者的后代很可能还会患遗传性糖尿病。 二、 植物基因工程与动物基因工程的成果 抗病毒烟草、抗病毒小麦、抗病毒番茄、抗病毒甜椒 抗病毒基因:病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因抗真菌基因:几丁质酶基因 抗病转基因植物 抗盐碱和抗干旱的烟草、抗寒番茄、抗除草剂的大豆和玉米 抗逆基因:渗透压调节基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因 抗逆转基因植物 抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米 抗虫基因:Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因 抗虫转基因植物 外源基因类型及举例 成果举例 转基因绵羊、转基因鲤鱼 外源生长激素基因 提高生长速度的转基因动物 乳汁中含乳糖较少的转基因 肠乳糖酶基因 改善畜产品品质的转基因动物 高赖氨酸玉米、耐储存番茄、新花色矮牵牛 优良性状基因:提高必需氨基酸含量的蛋白质编码基因、控制番茄成熟的基因、与花青
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