建筑环境测试技术色谱理论1剖析.pptVIP

* 色 谱 分 析 1.色谱分析基本理论 2.气相色谱分析 3.高效液相色谱分析 4.薄层色谱分析 第二章 色谱分析基本理论 2-1 色谱分析概述 一、色谱分析的概念 ㈠色谱法(chromatography)： 1906年，俄植物学家Tsweet创立色谱法： 玻璃柱 CaCO3 色素 石油醚 色素 (色谱柱) (固定相) (流动相) 色谱 色谱分析 色素 色谱法是利用物质在流动相和固定相之间的分配(或吸附等)差异进行物质分离的一种物理或物理化学分析方法。 色谱法先将混合物中各组分分离，然后逐一对各组分进行分析，是分析混合物的最有力手段之一。 ㈡色谱法分类 1.按两相物态分： 按流动相: 气相色谱法(GC)： 液相色谱法(LC)： 按固定相: 气-固色谱法(GSC) 气-液色谱法(GLC) 液-固色谱法(LSC) 液-液色谱法(LLC) 2. 按固定相所处“形态”分： 分为柱色谱法和平板色谱法 ⑴柱色谱法： ①填充柱色谱法 ②毛细管柱色谱法 ⑵平板色谱法： ①薄层色谱法(TLC) ②纸色谱法(PC) 3.按分离机理分： ⑴吸附色谱法 ⑶离子交换色谱法(IEC) ⑷空间排阻色谱法(SEC) ⑸毛细管电泳法(CE) ⑹毛细管电色谱法(CEC) ⑵分配色谱法 4.简单综合分类： 流动相系统 进样 系统 色谱柱 检测 系统 mv t(min) 记录系统 二、柱色谱分析的一般过程 试样 3.漂移d:基线随时间朝一定方向缓慢变化。用单位时间(1hr)基线水平变化d表示。 mv t Ib d 2-2 色谱流出曲线(色谱图)及有关概念 色谱流出曲线(色谱图)： 试样经色谱分离后的各组分进入检测器，所形成的检测器信号随时间变化的曲线。 一、基线(基流) 基线：纯流动相的色谱流出曲线 1.正常基线：水平直线。 2.噪音Ib：各种偶然因素引起的基线起伏。用噪音带宽Ib表示。 二、色谱峰 ㈠峰形 色谱峰有三种形状： 1.正常峰：对称正态分布曲线 2.拖尾峰 3.前延峰 ㈡峰参数：峰高、区域宽度和峰面积 2.区域宽度：柱效参数。三种表示方法： 0.607h σ σ ⑴标准偏差σ：正态峰两拐点间距的一半 σ=W0.607h / 2 h 1.峰高h h/2 ⑵半峰宽W1/2 ： W1/2 W1/2 =2 (2ln 2)1/2σ=2.355σ Wb = 4 σ=1.699 W1/2 ⑶峰(底)宽Wb ： Wb 3.峰面积A：定量参数 峰曲线与基线包围的面积。 计算方法： ①峰高乘半峰宽法： 对称峰：A=1.065hW1/2 ②峰高乘平均峰宽法： 不对称峰：A=1.065h(W0.15+W0.85)/2 ③自动求积法：利用积分仪、色谱工作站求积分面积 三、保留值：表示试样中个组分在色谱柱中的滞留时间，是定性参数。 ㈠保留时间 1.保留时间tR：从进样开始到某组分色谱峰顶的时间间隔。 tR2 tR1 t0 2.死时间t0 ：不被固定相滞留的组分的保留时间。即流动相从进样口到达检测器所需时间。 L 进样 检测 流动相流速：u tR1’ tR2’ 3.调整保留时间tR’： tR’ = tR - t0 可消除进样时间的影响 ㈡保留体积 1.保留体积VR(洗脱体积)：在某组分保留时间间隔内，通过色谱柱的流动相体积。 VR= utR u -- 流动相流速(ml/min) 2.死体积V0 ：死时间内通过色谱柱的流动相体积。即从进样器至检测器未被固定相占有的体积。即： V0=u t0 3.调整保留体积VR’： VR’ = VR -V0=u tR’ VR、 V0、 VR’与u无关。 t0 =L/u ㈢相对保留值α2,1： 某组分(2)的调整保留值与另一组分(1)的调整保留值的比值,称为该组分(2)的相对保留值。 α2,1 = tR2’/ tR1’ = VR2’ /VR1’ α2,1与柱温、固定相有关，与柱长、柱径、柱填充、流动相流速等无关。 四、分离度R 衡量相邻两色谱峰的分离程度，用相邻两色谱峰分开的距离是平均峰宽的几倍表示。 mv t tR2 tR1 W1 W2 定义：相邻两色谱峰保留时间之差与两色谱峰平均峰宽的比值。 R=(