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DCS 在青霉素发酵生产过程中的应用
一、引言
青霉素是发酵代谢过程中的产物,青霉素发酵是涉及青霉菌生长、繁殖及生产的复杂生产过程,主要有配料、消毒、种子、发酵、生化、霉菌及过滤等工序。青霉素发酵的生产水平取决于生产菌种的特性与发酵条件。在确定了生产菌种的条件下,要使青霉素发酵水平稳定、提高,发酵工艺调控是关键,发酵过程控制是发酵工艺调控方法的具体实施与体现。有效的调控发酵,通过对菌种的环境条件和代谢变化规律参数进行测量,使青霉菌代谢沿着有利于青霉菌的分泌方向进行,以较低的能耗和物耗生产较多的发酵产品,达到稳定和提高发酵水平的目标,发酵过程控制是一个重要的影响因素。
二、生产工艺特点
青霉素发酵是二级发酵,发酵大罐和种子罐发酵。发酵工艺的主要控制对象是由种子罐、发酵罐和补料系统三大部分组成。种子培养基实消后接入孢子,在一定的温度、压力及空气流量等条件下培养一定时间后转移至发酵罐;发酵培养基经实消后接入种子,在一定的温度、压力及空气流量等条件下进行发酵。
青霉素发酵为半连续发酵。当发酵进行到一段时间后,开始定量补如母液、前体、硫胺。氨水及水等料,以及时满足青霉素菌合成产物的需要。当发酵到一定时间后,由于有害代谢物的不断累积,产物积累最终难免受到阻遏,常用的解决办法是进行带放。放掉部分发酵液,补入适当料液,这样不仅补入了养分和前体,而且代谢有害物被稀释,有利于产物的继续合成。随着发酵周期的延长,青霉素进行量的积累,在产率降低时开始放罐。整个发酵周期一般在200h左右。
青霉素发酵的工艺流程示意图如图1所示
孢
子
种
子
罐
发
酵
罐
过
滤
配
料
自动消沫
母液
前体
硫胺
氨水
水
消毒
灭菌
消毒
灭菌
培养
发酵
图1 青霉素发酵的工艺流程示意图
青霉素发酵罐测量、控制点示意图如图2所示
图2 青霉素发酵罐测量、控制点示意图
其中:
T1、P1、F1:分别为进入发酵罐的消毒空气温度、压力、流量;
T2 、P2 、VCO2 、VO2:分别为尾气温度、压力、CO2含量和氧含量;
T31 、T32 :分别为冷却水进、出口温度;P3 、F3:分别为冷却水进口压力和流量;
T4 :发酵罐温度;B :发酵过程补料量;A :搅拌电流;
pH:发酵液pH 值;DO2:发酵液溶解氧浓度;ω:搅拌速度;
X、S、P、V:分别为发酵液中的菌丝浓度、葡萄糖浓度、产物效价、发酵体积。
三、影响青霉素发酵水平的因素
温度对发酵的影响
在发酵过程中需要维持生产菌的生长和生产的适当发酵条件,微生物的生长和产物的合成均需在其各自合适的温度下进行。温度是保证酶活性的重要条件,因此,在发酵过程中必须保证最适宜的温度环境。温度的变化对发酵过程产生两方面的影响:一是直接影响发酵过程中的各种反应速度;二是发酵罐内温度通过影响发酵液的物理性质,间接影响产物的合成。
pH值对发酵的影响
pH值是微生物生长和产物合成的非常重要的状态参数,是微生物代谢活动的综合指标。青霉素发酵一般采用在发酵过程中通过氨气控制pH值,既调节了pH值在适合青霉素合成的范围内,也补充了产物合成所需的氮源。青霉素生物合成的最适宜pH值为6.5-6.8。
补料对发酵的影响
在半连续发酵中总菌量、黏度和氧的需求一直在增加,直到氧气受到限制。据此,可通过补料速率的调节来控制生长和氧耗,使菌处于半饥饿状态,以使发酵液有足够的氧,从而达到高的青霉素生产速率。
泡沫对发酵的影响
发酵过程中因通气搅拌与发酵产生的二氧化碳,以及发酵液中糖、蛋白质和代谢物等稳定泡沫的物质的存在,使发酵液含有一定数量泡沫,这是正常的现象。泡沫的存在可以增加汽液接触面积,有利于氧的传递。当发酵液中含有大量泡沫时,会引起“逃液”,给发酵带来负面影响,表现在:(1)损失发酵液;(2)增加杂菌污染的机会;(3)消沫剂的加入有时会影响发酵或给提炼工序带来麻烦。
四、控制要求和控制方案
概述
青霉素发酵控制系统主要完成对所有相关点的数据采集、控制和补料控制。发酵岗位控制系统分为两部分:
(1)大罐发酵控制系统
(2)种子罐发酵控制系统
大罐发酵控制系统
1)发酵大罐的检测点
发酵温度、消毒温度
空气流量检测
pH值检测
DO检测
液位检测
2)控制点
发酵温度控制
自动补料控制
pH值控制
消沫控制
3)发酵控制要求及方案
(1)发酵大罐发酵温度控制
工艺要求:发酵罐温度控制在26-28度,发酵液温度通过冷却水控制,波动不大于0.5度,当发酵液较少时,发酵液温度不进行控制。
控制精度:0.5度。
控制方案:发酵罐温度采用单回路调节。
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