课件：内毒素、β葡聚糖和降钙素检测的临床应用.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 协和医院数据 医院感染监控网 国内侵袭性真菌感染不容忽视 临床药物治疗杂志 2007年第5卷第1期 感染率(%) 中国感染与化疗杂志2008 年7 月20 日第 8 卷第4 期 尸检研究发现，75%的侵袭性真菌感染病例在生前漏诊 诊断困难的主要原因： --- 临床表现不典型，易被基础疾病所掩盖 --- 确诊常需侵入性手段获得组织标本，侵入性操作常因患者 的病情所限难以实施 --- 真菌检测项目开展相对不足或滞后 IFI诊断困难及漏诊情况严重 主要可引发侵袭性真菌感染的疾病 肺炎 肺纤维症 脑出血 脑梗塞 硬膜下血瘤术后 胸部大动脉瘤术后 糖尿病 再生障碍性贫血 MODS DIC 胃癌，肝癌，肝内胆管癌，肺癌，多发性骨髓瘤，白血病，恶性淋巴瘤 肺结核 腹腔内脓肿 AIDS 呼吸系统 疾病 感染症及 寄生虫病 循环系统 疾病 内分泌 疾病 血液及造血 器官疾病 肿瘤类 侵袭性真菌感染( invasive fungal infection, IF I)的发病率逐年上升,其中又以侵袭性肺部真菌感染( invasive pulmonary fungal infection, IPF I) 最常见,大约占50%～60%。未经及时治疗的肺部真菌感染患者的病死率可高达30% ～80% 。 　侵袭性肺部真菌感染 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 临床表现：缺乏特异性,多表现为发热、咳嗽、咳痰、咯血、胸闷、呼吸困难等。 现 状：两高两低一快 检测方法相对滞后,早期诊断和治疗仍存在困难,副作用小的 新型抗真菌药物价格昂贵,导致病死率高。 高院内感染率和病死率 低临床和实验室诊断率 患者病情恶化快 　侵袭性肺部真菌感染 死亡率(%) 诊断延迟 时间 (h) ICU诊断延迟时间与死亡率的关系 11 33 30 35 10 15 20 25 30 35 12 h 12-24 h 24-48 h 48 h Morrell M et al. Antimicrob Agents Chemother 2005, 49:3640–3645. 美国四大医疗中心做的一项回顾性研究 死亡率(%) 诊断延迟时间(d) Garey KW et al. Clin Infect Dis 2006, 43:25–31 . b1,6 葡聚糖 磷脂双分子层 几丁质 麦角固醇 b1,3葡聚糖 合成酶 mannoproteins β1,3 真菌细胞膜、壁结构 羊毛固醇C－14去甲基化酶 14位还原和7－8位异构酶 角鲨烯环氧化酶 1-3-β-D-葡聚糖本质及特点 真菌细胞壁成分，占50%以上 1 其他微生物、动物及人的细胞不含该成分 2 用于侵袭性真菌感染的早期诊断 3 (1-3)-β-D-葡聚糖特性 1. 2. 3. 对热极为稳定，高压 121℃并不能使其灭活。 在念珠菌和曲霉菌细胞 壁中含量较多，对G 试验灵敏。 当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，(1-3)-β-D-葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液中含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫系统可将其清除。 在浅部真菌感染中，(1-3)-β-D-葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高。 “G”试验缘何而来？ 1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。 （1-3）?-D-Glucan LAL-RM(反应物) G因子 活化G因子 凝固酶原 凝固酶 凝固蛋白原 凝固蛋白（凝胶） 试验反应机理图： 内毒素与β-葡聚糖的检测比较 已知能与鲎试剂发生反应的物质有细菌内毒素和β-葡聚糖，但它们的反应曲线不一样。内毒素反应曲线为S型特征曲线，而β-葡聚糖反应曲线为经过0点的斜线。 ? 内毒素和β-葡聚糖与鲎试剂反应的特征曲线 观察期不确定，费时费力，特征性不明显并对医师的专业水平要求高 辅助方法：临床表现，免疫学，病理学，影像学检查等 用于实验室检测，已成为这一领域研究的热点 3.PCR技术：真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查和真菌核酸检测 对儿童及接受造血干细胞移植患者、ICU患者不适用 2.GM试验：曲霉属半乳甘露聚糖抗原检测。判断是否曲霉属真菌感染 耗时短，灵敏度高，特异性强，定量检测可判断感染严重程度 1.G试验：通过检测(1-3)-β-D-葡聚糖的含量，判断是否有真菌感染 非传统 检查 敏感性低，耗时长, 培养阳性率低。培养结果是定性的，有些标本采集困难 直接培养真菌法 传 统 检 查 特 点 方 法 侵袭性真菌感染的临床