低分子量硫酸化多糖的体积排阻色谱法分离及其组成定量分析.docx

研究论文DOI: 10． 3724 / SP． J ． 研究论文 DOI: 10． 3724 / SP． J ． 1123． 2011． 10005 摘要: 建立了用于分离并定量测定低分子量硫酸化多糖中不同糖链数的各个组分分布比例的体积排阻色谱方法。 系统考察了流动相的组成、离子强度和 pH 值、流速、柱温等因素对分离的影响。最佳分离条件: 两支 TSK-GEL G2000 SWxl 色谱柱( 300 mm × 7. 8 mm) 串联，流动相 100 mmol / L Na2 HPO4 -NaH2 PO4 ( pH 7. 0) ，流速 0. 5 mL / min，柱 温 35 ℃ ，进样量 5 μL，样品质量浓度 10 g / L。在最佳的分离条件下，可以将低分子量硫酸化多糖样品中不同糖链 数的各个组分分离并对各个组分的分布进行了定量分析。用该方法对美国药典标准品( USP ) 、商品和实验室制备 的低分子量硫酸化多糖糖链数分布进行了定量化比较，证明该方法可用于低分子量硫酸化多糖类药物的组成成分 的质量控制。 关键词: 体积排阻色谱; 低分子量硫酸化多糖; 组成分布; 质量控制 中图分类号: O658 文献标识码: A 文章编号: 1000-8713( 2012) 02-0178-06 Abstract: As the co m po sitio n o f lo w m o lecular w eight sulfated po lysaccharides is very co m - plex ，the quantitative analysis o f their co m po sitio ns is very im po rtant fo r understanding their bio activity and the purpo se o f the quality co ntro l． A m etho d w as develo ped fo r the separatio n and quantitative analysis o f the co m po sitio n o f lo w m o lecular w eight sulfated po lysaccharides ． The effects o f the param eters ，such as the m o bile phase co nstitutio n including io nic strength and pH，co lum n length and tem perature ，flo w rate o f the m o bile phase o n the separatio n w ere system atically investigated ． The o btained o ptim al co nditio ns w ere as fo llo w s : tw o TSK-GEL G2000 SWx l co lum ns ( 300 m m × 7. 8 m m ) Na 2 HPO4 -NaH2 PO4 ( pH 7. 0 ) ; flo w rate ，0. 5 co upled to gether; m o bile phase ，100 m m o l / L m L / m in ; co lum n tem perature ，35 ℃ ; injectio n The m etho d w as validated in term s o f its repro - vo lum e ，5 μL; sam ple co ncentratio n ，10 g / L． ducibility and ro bustness ． Under the o ptim ized chro m ato graphic separatio n co nditio ns ，each co m po sitio n o f the lo w m o lecular w eight sulfated po lysaccharide can be clearly separated ，and their distributio n ratio s w ere quantitatively analyzed ． The co m po sitio n pro filings o f the sam ples fro m United States pharm aco po eia ( USP )