基于中药难溶性有效成分甘草酸的磷脂胆盐混合纳米胶束新型给药系统的研究-药剂学专业论文.docxVIP

HYPERLINK \l _bookmark0 参考文献 66 致 谢 错误!未定义书签。 HYPERLINK \l _bookmark1 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 71 声 明 错误!未定义书签。 中文摘要 甘草酸（GL）是大宗中药甘草的主要活性成分之一，是由一分子甘草次酸 （代谢产物）和两分子的葡萄糖醛酸组成黄酮类化合物。甘草酸具有抗病毒、抗 氧化、抗炎、解毒及抑制致癌因子等作用，临床上主要用于肝病的治疗。但由于 甘草酸属中药难溶性有效成分，在水溶液中易形成聚集体，胃肠道渗透性极差， 从而导致口服生物利用度低，极大限制了甘草酸的临床应用。本研究以甘草酸为 模型药，采用混合胶束技术，进行难溶性药物新型给药系统的研究，为提高中药 难溶性成分的临床疗效提供依据。 本 研 究 采 用 薄 膜 分 散 法 制 备 了 甘 草 酸 磷 脂 / 胆盐 混合 胶束 (GL-SDC/PL-MMs)，并通过星点设计—效应面法对混合胶束的制备工艺进行考 察，最终确定最佳制备工艺为：将 1.19g 磷脂溶解与乙醇中制备成标准溶液。试 验前一天上述标准液与烧杯中，在氮气下吹干大部分有机溶剂，再放入真空干燥 箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，即制成脂膜。将 1.0g 脱氧胆酸钠溶于 pH=7.4 的 PBS 中制成 15 mmol·L-1 胆盐溶液，将脂膜与胆盐溶液在 45℃水浴中超声混合 45min，即得澄清透明的磷脂/胆盐空白混合胶束。将过量的甘草酸粉末加入空白 胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均匀搅拌 24h，0.45μm 微孔滤膜除去 多余粉末，即得甘草酸磷脂/胆盐混合载药胶束。 本文对 GL-SDC/PL-MMs 的理化性质及初步稳定性进行了考察。结果表明甘 草酸磷脂/胆盐混合胶束平均粒径为（82.99±7.51）nm，多分散度指数 PI 为 （0.096±0.015），zeta 电位为（-32.23±1.05）mV；透射电子显微镜显示混合纳米 胶束为圆形或类圆形，且粒径大小与激光粒度分析仪所述范围相符；采用芘荧光 探针法测定了甘草酸磷脂/胆盐混合纳米胶束的临界胶束浓度为 0.0025 g/L，预 示混合胶束在进入体循环后可能具有良好的抗稀释作用；储存稳定性结果表明在 90 天内，制备的混合胶束具有良好的稳定性，然而在 120 天时，混合胶束的平 均粒径、PI 、zeta 电位及载药量发生了明显的变化，为不稳定体系。 为了使甘草酸磷脂/胆盐混合胶束可长期储存，本研究以干燥速率、外观及 粒径变化差值为指标，对混合胶束的固体化工艺进行了研究，结果发现，流化床 干燥速率快，得到大小均一的白色小丸，压碎复溶仍为无色透明溶液，经粒径测 定表明干燥前后粒径变化较小，方法稳定可行，重现性好。因此最终选择流化床 I II II 干燥技术作为甘草酸磷脂/胆盐混合纳米胶束固体化的最佳方法。 本研究亦通过建立甘草酸体外溶出度的测定方法，对甘草酸磷脂/胆盐混合 纳米胶束干燥小丸（DP-GL-SDC/PL-MMs）和甘草酸原料药的溶出行为进行了 比较。结果显示，在 60 min 内，DP-GL-SDC/PL-MMs 的累积溶出率为 96.72%， 而甘草酸原料药的最大累积溶出率分别只有 50.69%，说明将甘草酸制备成磷脂/ 胆盐混合纳米胶束后药物溶出速率得到明显提高。 为了考察甘草酸磷脂/胆盐混合纳米胶束的体内生物利用度，本文建立了甘 草酸体内代谢产物甘草次酸血药浓度的 HPLC 测定方法，并以甘草酸原料药及甘 草酸二胺胶囊为参比药，研究了甘草酸磷脂/胆盐混合纳米胶束的体内药代动力 学。由于甘草酸原料药在相同给药剂量下，甘草次酸的血药浓度低于 HPLC 测定 的最低检测线，因此将 GL-SDC/PL-MMs 和甘草酸二胺胶囊组的血药浓度-时间 数据用 DAS 2.0 药动学软件处理。结果显示，甘草酸在大鼠体内药代动力学行为 符合二室模型。与甘草酸二胺胶囊相比，GL-SDC/PL-MMs 组大鼠 Cmax 由 （18.73±7.55）μg?mL-1 增加为 (77.26±18.20) μg?mL-1，AUC0-24 由（121.8±10.53） μg?mL-1?h 增加为(343.288±25.88) μg?mL-1?h。说明 GL-SDC/PL-MMs 较甘草酸原 料药及甘草酸二胺胶囊在体内更容易被吸收，GL-SDC/PL-MMs 显著提高了甘草 酸的体内生物利用度。 为了研究 GL-SDC/PL-MMs 对肝损伤的治疗作用，本文通过腹腔注射四氯化 碳建立小鼠急性肝损伤模型，以联苯双酯为阳性对照药，以甘草酸原料药及甘草 酸二胺胶囊为参比制剂，观察 GL-SDC/PL-MMs 对小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、 谷草转氨酶（A