脊髓背角C-纤维诱发LTP诱导和维持机制探讨-神经生理学专业论文.docxVIP

孛虫丈学耱±论文 孛虫丈学耱±论文 脊髓鹜角C--纤维诱发LTP诱导帮维持轨锚舞谆 脊髓背角C一纤维诱发电位长时程增强的诱导和维持 机制探讨 壤±磺究生：售 文 君 导 师：刘先瀚教授 专 舭：生 璎 学 中由大学基磁医学院生理教磷壅 广援510089 摘 要 组织或神经损伤可引起病理蚀疼痛，表现为痛阈下降(allodynia，a}伤害 性刺激号f起疼痛)、瘸反应增强(hyperalgesia)和自发性疼瘸。病理性疼痛晦 一个藏藉特点是持续辩淘长，损伤修复后仍哥掩续数瘸、数弼、乃至数譬。由于 病理悛疼痛的机制尚不清楚，临床上还没有恰当的治疗方法。大量研究袭明，强 烈的伤密性刺激导数中枢敏感化(central sensitization)，表现为脊髓鬻角神 经元瓣游奋往持续瞧增高。这可筑是产生持续校疼痛戆重要鼹困之一。稳是，中 枢敏感化如何形成，又如何维持尚不清楚。 农中枢神经系统，神经元之阏信患传递主嚣是通过突触寒实现的。大襞的研 究表明，突触传递静效率不是固窥不交静，瑟怒兵有疆显静阿塑往。突黻传递效 率的长时程增强(10ng-term potentiation，LTP)首先发现于海马，被认为是 学习和记忆的神经熬础。1995刘建国教授首次报道了电刺激c纤维弓l越脊髓背 角e纤维诱发电位豹长融程增强，为磅究痛懿避敏的孛枢税铡提供了薪豹线索。 我们已往的工作证明，初级传入C纤维与脊髓背角神经元之间的突触传递也具有 可塑性。强直电刺激坐骨神经中的C纤维可弓l趟脊馥背角C终缭诱发电位的长时 程增强(LTP)，持续至少lo小时以上。众繇桶知，e纾缭与脊髓鹜角牢孛经元形 成第～级突触，其主蒙功能是传导痛觉。因此，我们提出，脊髓背角c纤维诱发 电位驰投P可能是 秘癔记忆，该记忆是组织、神经损伤弓l超盼中枢敏感他的神 经基础。这一设想褥到下列实验诞据的有力文将：①与瘸鬣过敏耜一致，阻断 中山大学博士论文 中山大学博士论文 脊髓背角c一纤维诱发LTP诱导和维持机制探讨 NMDA受体(～种谷氨酸受体)或神经肽受体(NKl或NK2)可防止脊髓背角LTP 的产生。②急性损伤神经(在刺激电极的外周端切断或钳夹坐骨神经)也能引起 脊髓背角c纤维诱发电位的LTP；⑤用引起脊髓背角LTP的强直电刺激兴奋坐骨 神经可引起动物长达数天的痛觉过敏。 与海马LTP的研究相比，脊髓背角LTP的研究才刚刚起步，有许多问题有待 探讨。本项目在我们以往研究的基础上，探讨与脊髓背角LTP表达和维持相关的 几个重要问题。这对理解脊髓背角痛记忆的机制和最终干预病理性疼痛具有重要 的理论和实际意义。 LTP表现为强直刺激突触前神经元引起突触后神经元对后续刺激的反应 (以兴奋性突触后电位为指标)持续增强。海马LTP的研究表明，兴奋性突 触后电位持续增大的原因是由于突触前末梢兴奋性递质的释放增多和突触后 神经元对递质的反应增强，此谓LTP的突触前表达和突触后表达。兴奋性突 触传递主要是由谷氨酸介导的。在突触后膜存在两类谷氨酸受体，即亲离子 型谷氨酸受体和代谢型谷氨酸受体。亲离子型谷氨酸受体又可分为AMPA受体 和NMDA受体。一般认为，谷氨酸作用于AMPA受体引起Na+内流，介导兴奋 性突触传递。而NMDA受体不参与正常的突触传递，因为在静息膜电位下该受 体被M92+阻断，此时即使有谷氨酸与NMDA受体结合也不能引起通道的开放。 强直刺激引起突触后膜持续性去极化，去除了M92+的阻断作用，使NMDA受体 通道开放，引起ca”内流。大量研究表明突触后神经元内ca”浓度升高是诱 导LTP所必需的。LTP的突触后表达涉及以下三个方面：(1)突触后神经元 内Ca2+浓度升高激活细胞内钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(CaMKII)、蛋白激酶 C(PKC)和蛋白激酶A(PKA)。活化的蛋白激酶再使细胞膜上的AMPA受体磷 酸化，导致单通道电导增强和开放概率增大。(2)细胞内己存在的或新合成 的AMPA受体被组装到突触后膜。在此过程中磷酸化的CaMKII、PKC和 Ras—E4PK信号通路起重要作用。如果AMPA受体被组装到已有AMPA受体的突 触后膜，则使AMPA受体的密度增大，导致突触反应增强；如果hMPA受体被 组装到仅有NMDA受体而不存在AMPA受体的突触后膜，则原本沉默的突触 (silent synapse，如前所述NMDA受体不参与正常的突触传递)转变为活动 突触。据认为该过程在LTP的表达和维持中非常重要。(3)LTP的晚期(3h 串出大学瓣圭论文 串出大学瓣圭论文 弩髓错角e一绎维诱茨LTP诱导帮维持糗苇l探讨 以后)维持需要繁因转录和新的蛋白质合成。某些新合成