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第九章 转基因技术 第一节 概述 第二节 转基因鱼的构建 第三节 转基因水产动物的安全性 1984年,朱作言率先开展了转基因鱼研究, 研制出世界首例转基因鱼,建立了第1个转 基因鱼模型。 之后,英国、法国、美国、加拿大和日本等 几十个实验室相继开始转基因鱼研究。 转基因鱼研究已经成为鱼类基因工程研究的 热点领域。 基因工程(基因操作): 是指将一种或多种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。 转基因:指在DNA操作过程中整合到动植物受 体细胞染色体上的外源基因。 转基因技术:为了能够使外源基因在动植物体内稳 定展现出相应的生物学表型,必须采 用转基因的重组子构建技术、重组分 子导入动、植物体内的转化技术、转 基因在受体细胞染色体上的稳定整合 及可控性表达技术,这些技术统称为 转基因技术。 二、转基因技术在水产动物育种中的应用 (一)转基因技术在鱼类育种中应用 1、改良养殖性能 (1)培育快速生长特性的鱼类新品种 (2)提高养殖鱼类的抗寒能力 (3)提高养殖鱼类的抗病能力 2、生产医药生物制品 经修饰含有人胰岛素基因的罗非鱼卵 子,受精后孵化的鱼苗体内可呈现人胰岛 素基因及其表达产物。 3、培育新型观赏鱼或其他用途 绿色水母及红色珊瑚的基因导入斑马鱼,培育出各种颜色的荧光斑马鱼。 将萤火虫基因注入斑马鱼的基因组内,以测试水质污染。若水中含有聚氯联苯,斑马鱼便会发光 转荧光蛋白基因唐鱼新品系 (二)虾类、贝类转基因技术的研究 1、虾类 孔杰(1992)运用精子介导外源基因转移到中国对 虾卵子中,基因转移比率1%以上。 刘萍等(1996年)采用显微微量注射方法,将羊 生长激素基因导入中国对虾受精卵,基因转移比率 至少在3%以上。 刘志毅等(2000)用基因枪法,获得具有绿色荧 光蛋白(GFP)基因表达产物的转基因对虾。 ﹕ ﹕ 2、贝类 中科院海洋所与发育生物学研究所利 用电脉冲导入法将鱼生长激素基因导入去 膜的贻贝受精卵内,阳性率达到41%。 ﹕ ﹕ 三、转基因技术研究现状与前景 ? 1、转基因动物 首例转基因动物“硕鼠” (1982年) 转基因鱼(1985年) 转基因猪(1985年) 转基因牛(1989年) 转基因山羊(1991年)等成功 我国转基因鱼研究现状: 研究热点:生长激素基因(鲤、草鱼、虹鳟、鲷鱼、大马哈鱼、金枪鱼等) 抗冻蛋白基因(美洲似蝶、黄盖蝶、瓦氏雅罗鱼等);抗逆性的基因等 * 首先在鲤鱼、鲫鱼、银鲫、泥鳅(1985)中进行,将小鼠重金属基因启动子和人生长激素基因导入受体鱼中,建立了转基因鱼模型,转基因鲤鱼、鲫鱼已繁殖子一代,证实了外源基因可以通过生殖细胞传递给后代 * 将小鼠重金属基因启动子和人生长激素基因导入团头鲂和鲤鱼,外源基因得到表达,具有促生长效应,其子代带有外源基因并仍具有促生长效应 * 获得了鲤鱼、草鱼的肌动蛋白基因启动子和草鱼的生长激素基因组合成全鱼基因,导入鲤鱼和银鲫 * 将大西洋条鳕抗冻蛋白基因启动子和大麻哈鱼生长激素基因、大西洋条鳕抗冻蛋白基因启动子和虹鳟溶菌酶基因组合成全鱼基因,导入团头鲂并表达 * 快速生长转基因鲤鱼完成,筛选获得转“全鱼”生长激素基因黄河鲤鱼核心群200尾,生长速度比对照鱼快140%以上 具备大规模苗种繁育生产能力, 其F1代的大规模养殖不仅增产,而且可降低养殖成本,并为转基因鱼的进一步选育提供材料 转“全鱼”生长激素基因三倍体鱼平均体重增长速度比对照鱼提高15%,由此建立了转“全鱼”生长激素基因鱼高效、安全的养殖模式 发展趋势: 选择适当的基因启动子 寻找新的目的基因 提高外源基因的整合、表达与遗传能力 鱼类克隆,建立纯系转基因个体 将基因转移方法和核移植方法相结合培育新品种 克隆猫 动物生物反应器 动物生物反应器是利用转基因动物的乳腺组织来生产药用蛋白及其它蛋白。到2010年,所有基因工程药物中利用乳腺生物反应器生产的份额将达到95% 例:1991年利用牛IVE原核胚进行微注射,并得到转入牛酪蛋白—人乳铁蛋白融合基因的转基因乳牛的工作,每升牛奶中含有人乳铁蛋白1克,具有“划时代”的意义 2、治疗人类遗传病 基因组研究 90年代,大规模地对系统发生谱中从病毒开始到细菌、植物、动物以至人类的基因组进行描绘和DNA测序,其目的是测定不同生物所表达的蛋白质全部图谱以及确定有关基因的复杂特性和弄清能引起遗传性疾病的基因 20世纪末已完成全部人类基因组图谱
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