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急性髓细胞白血病的微小残留病检测
陈苏宁
苏州大学附属第一医院
江苏省血液研究所
MRD的概念和检测技术
AML患者的MRD检测标志
AML患者MRD检测的临床意义
MRD是指在白血病患者完全缓解后,体内残存少
量白血病细胞的状态
MRD检测对于评估疾病状态、判断疗效、预测复
发、早期干预具有重要临床意义
多参数流式细胞仪和荧光定量PCR技术的发展显著
提高了MRD检测的敏感性和准确性
常用MRD检测技术及其敏感性
敏感性低
FCM技术
白血病细胞可出现异常的免疫表型以及细胞散射光
特征的改变
FCM检测MRD的原理是对散射光异常或“白血病相
关”表型进行检测,可同时定量测定多个参数变化
-3 -4
FCM检测MRD的敏感性约在10 ~10
适用范围广、操作快捷
尚未发现真正意义上的白血病细胞特异性抗原
实时定量RT-PCR
在PCR 中引入了荧光标记分子,通过监测荧光信号
的积累来观察整个循环过程,计算PCR产物量
保持经典PCR灵敏、快速的特点,克服了传统PCR技
术不能准确定量和假阳性污染的缺点
测序技术的发展为MRD检测
提供了潜在的新技术手段!
伴有5q-的低危MDS患者TP53基因突变
MDS患者TP53突变率 Sanger测序
低危MDS :5-10% (单纯5q- :0/20)
高危MDS :10-15% (伴有5q-的复杂核型:
5/6, 83%)
治疗相关MDS :伴有5q-,26/34,76% ;不
伴有5q-,8/106,7.5%
普通Sanger法测序,异常细胞比例>20% ,第 第二代测序技术
二代测序技术可以轻易达到500x的测序深度,
提高异常克隆的检出率
来自瑞典、英国和德国的协作组采用第二代
测序技术对伴有5q-的55例低危MDS患者进
行了TP53基因突变检测
Jädersten M, et al. J Clin Oncol 2011.
55例MDS患者
IPSS :低危32例;中危-1 23例;
伴有单纯5q-MDS :50例
RCMD (伴有5q-和其它染色体异常):4例
伴有单纯5q- RAEB :1例
10/55 (18%)的患者检出TP53突变,平均突变克隆比
例18% (1-54%)
检出TP53突变患者向AML转化率高于阴性MDS患者
37例来那度胺治疗,TP53突变组来那度胺治疗后完
全细胞遗传学缓解比例低于阴性组(0/7 vs. 12/24)
Jädersten M, et al. J Clin Oncol 2011.
MRD的概念及其检测技术
AML患者的MRD检测标志
AML患者MRD检测的临床意义
一、免疫标志
二、染色体易位和融合基因
三、基因突变
四、异常表达的AML相关基因
正常造血细胞在其分化不同阶段的抗原表达受一系列
基因严密控制,在一定分化阶段哪些抗原表达及抗原
表达量的多少存在着明显的规律性
AML细胞可出现白血病相关异常免疫表型(LAIP )
非同步抗原同时表达
交叉抗原同时表达
抗原表达量异常
细胞表面与胞浆内抗原同时表达
光散射信号改变等
FCM检测LAIP作为MRD标志适用于75-85%的AML
和95 %的ALL患者
-3 -4
FCM检测MRD的
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